УДК: 61:578.7;616-07:061.62
Год издания: 2001
СОЗДАНИЕ КОЛЛЕКЦИИ РЕКОМБИНАНТНЫХ ПЛАЗМИД
Марьянкова Р.Ф., Счесленок Е.П., Тарасова Т.А., Лытнева Т.М., Владыко А.С.
Рубрики: 76.03.41
Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии
Тема НИР: «Создать коллекцию рекомбинантных плазмид в рамках Национальной коллекции вирусов, патогенных для человека».
Сроки выполнения НИР: июль 1998 г. - декабрь 2000 г.
Научный руководитель: д-р мед. наук А.С. Владыко.
Биотехнология является одной из наукоемких отраслей промышленности, где используются многочисленные штаммы микроорганизмов, полученные методами генной инженерии. В настоящее время остается актуальным получение рекомбинантных ДНК, содержащих в составе плазмидных векторов нуклеотидные последовательности отдельных генов (или их участков) вирусов, патогенных для человека.
За отчетный период были получены 8 рекомбинантных плазмид, содержащих генетический материал аренавирусов (высокопатогенного для человека вируса Ласса, возбудителя одноименной геморрагической лихорадки, вируса лимфоцитарного хориоменингита (ЛХМ), вируса Мопейя, непатогенного для человека) и хантавирусов (Хантаан и Пуумала, возбудителей геморрагической лихорадки с почечным синдромом). Получены рекомбинантные плазмиды, содержащие фрагменты генов белков NP, GPC для вируса Ласса и Мопейя, NP для вируса ЛХМ, G2 для вируса Хантаан, NP вируса Пуумала и РНК-зависимой РНК-полимеразы для вирусов Ласса и Мопейя.
Результаты электрофоретического анализа показали, что полученные рекомбинантные плазмиды содержат вирусспецифические вставки. Размер вставки pc DNA3/Lassa NP составляет 1700 нуклеотидных пар (н.п.), pc DNA3/Lassa GPC - 1300 н.п., pc pAT/Lassa L - 2000 н.п., pM 20410-L - 720 н.п., pM 20410-S - 1440 н.п., pc KNP/NP LCM - 1300 н.п., pCRII/ HAN G2 - 365 н.п., pJC40/NP PUU - 351 н.п.
Все полученные плазмиды зарегистрированы в Национальной коллекции вирусов НИИ ЭМ. Дальнейшие исследования могут проводиться без специальных защитных технологических линий, обеспечивающих безопасную работу с вирусами 1-2 групп.
Область применения: вирусология.
Рекомендации по использованию: рекомбинантные плазмиды могут быть использованы при производстве диагностических препаратов.
Предложения по сотрудничеству: выполнение заказов по получению рекомбинантных плазмид.