УДК: 616-097-034
Год издания: 2001
НОВЫЕ ДИАГНОСТИКУМЫ ДЛЯ ОЦЕНКИ ИММУННОГО СТАТУСА
Новиков П.Д., Янченко В.В., Железняк Н.В., Минин С.Е., Беленькая Л.Е., Смирнова О.В., Зубарева И.В., Писаренко Ю.П., Галынчик В.А., Чижикова И.К.
Рубрики: 76.03.55
Витебский государственный медицинский университет
Тема НИР: «Разработать новые диагностикумы для оценки иммунного статуса и организовать их производство».
Сроки выполнения НИР: I кв.1998 г. - IV кв. 2000 г.
Научный руководитель: д-р мед. наук, проф. Д.К. Новиков.
Цель исследования - разработать стабильные диагностикумы для определения субпопуляций Т- и В-лимфоцитов человека на основе моноклональных антител.
В работе испытаны эритроциты крупного рогатого скота, баранов, латекс с целью выявления возможности их применения в качестве носителей антител. Фиксированные эритроциты обрабатывали различными активаторами-фиксаторами: формалином, хлористым хромом, риванолом, глютаровым альдегидом, акролеином. Выбраны оптимальные условия для обработки эритроцитов мышиными моноклональными антителами против Т- и В-лимфоцитов человека: активированные частицы покрывали антителами против иммуноглобулинов мышей. Затем мышиные моноклональные антитела против антигенов CD3, CD4, CD8, CD25 Т-лимфоцитов, CD22 В-лимфоцитов связывали с ними. В результате получили диагностикумы, которые использовали в тестах розеткообразования с лейкоцитами (лимфоцитами) крови человека.
Проведен сравнительный анализ данных новых диагностикумов и других методов. Результаты тестов розеткообразования коррелировали с таковыми проточной цитометрии и непрямой иммунофлуоресценциии. Проведена апробация методов у здоровых и больных, в частности у детей с бронхитами выявлены изменения иммунного статуса. Новый метод оказался достаточно приемлемым и эффективным:
Предложенный способ оценки клеточных показателей иммунной системы с помощью анти-CD-диагностикумов позволяет снизить стоимость анализа за счет исключения дорогостоящей аппаратуры, этапа использования меченного конъюгата при маркировке клеток, уменьшении количества антител, а также дает возможность применять метод в недостаточно оснащенных лабораториях.
Применение нового диагностикума регламентировано следующими нормативно-правовыми документами: инструкция по применению № 67-0005 «Методы определения Т- и В-лимфоцитов диагностикумами на основе моноклональных антител», утвержденная МЗ РБ 12.06.2000 г.; регистрационное удостоверение МЗ РБ «Диагностикумы стабильные на основе моноклональных антител для выявления субпопуляций Т- и В-лимфоцитов человека», ТУ РБ 300002704.001-2001. ИМН № ИМ-7.2481. № 0000015.
Область применения: оценка иммунного статуса при различных заболеваниях.
Рекомендации по использованию: метод внедрен на кафедре клинической иммунологии и аллергологии (разработчик) ВГМУ, в лабораториях Витебской областной клинической больницы, Витебской детской областной клинической больницы, Минской областной клинической больницы, ЦНИЛ БелМАПО, НИИ охраны
Предложения по сотрудничеству: консультативная помощь при внедрении; изготовление по заказам единичных изделий и малых партий продукции.