УДК: 579.873.21:615.281.873.21
Год издания: 2001
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ МИКОБАКТЕРИЙ ТУБЕРКУЛЕЗА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МЕТОДА ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ
Скрягина Е.М., Залуцкая О.М., Рот А., Маух Х., Николенко Е.Н.
Рубрики: 76.29.53
Научно-исследовательский институт пульмонологии и фтизиатрии
Тема НИР: «Разработать и внедрить в клиническую практику методы повышения эффективности лечения больных с остропрогрессирующими формами туберкулеза легких, а также выделяющих лекарственно-устойчивые популяции микобактерий».
Сроки выполнения НИР: январь 1998 г. - декабрь 2000 г.
Научный руководитель: д-р мед. наук Г.Л. Гуревич.
Соисполнители: легочная клиника Хекесхорн-Целендорф, Берлин, Германия.
Целью исследования была оценка эффективности определения лекарственной чувствительности микобактерий туберкулеза (МБТ) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
Сравнительное исследование по определению лекарственной чувствительности МБТ методом ПЦР и на среде Левенштейна - Йенсена выполнено на 19 штаммах МБТ, выделенных от больных туберкулезом органов дыхания. Определение лекарственной чувствительности штаммов МБТ методом ПЦР проводилось с использованием экспериментального диагностического набора посредством определения нуклеотидных последовательностей в генах kat G и inh A для изониазида, в гене rpo B - для рифампицина. Определение лекарственной чувствительности штаммов МБТ на среде Левенштейна - Йенсена проводилось методом абсолютных концентраций. Определялась чувствительность к изониазиду в концентрации 1 мкг/мл, рифампицину - 20 мкг/мл. Средняя длительность исследования на яичной среде составила 21 сут, методом ПЦР - 1 сут.
Совпадение результатов определения лекарственной чувствительности к изониазиду методом ПЦР и на среде Левенштейна - Йенсена было получено в 19 случаях (100%). Совпадение результатов определения лекарственной чувствительности к рифампицину методом ПЦР и на среде Левенштейна - Йенсена было получено в 17 случаях (94,4%). В 1 случае (5,6%) методом ПЦР была определена лекарственная чувствительность к рифампицину у штамма МБТ, резистентного к препарату при определении лекарственной чувствительности на среде Левенштейна-Йенсена.
Таким образом, нами было показано, что результаты ПЦР-исследования коррелируют с данными, полученными с использованием классического метода на среде Левенштейна - Йенсена. Использование метода ПЦР позволило сократить сроки исследования до 1 сут.
Область применения: фтизиатрия, микробиология.
Рекомендации по использованию: метод может быть внедрен в бактериологических лабораториях противотуберкулезных диспансеров.
Предложения по сотрудничеству: консультативная помощь при внедрении.