|
УДК: 616. 9
Год издания: 2002
РАЗРАБОТКА СПЕЦИФИЧЕСКОГО ЛАКТОИММУНОГЛОБУЛИНА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ РОТАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ
Гудков В.Г., Виринская А.С., Головачева В.Н., Дорогова С.В., Коржев М.О., Микицкий Д.Р., Москалев В.В., Гулькович Р.Д.
Рубрики: 76.29.50
Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии
Тема НИР: «Разработать технологию получения нового лечебно-профилактического препарата — лактоиммуноглобулина противоротавирусного и организовать его производство».
Сроки выполнения НИР: 1998–2001 гг.
Научный руководитель: канд. мед. наук В.Г. Гудков.
Целесообразность разработки противоротавирусного лактоиммуноглобулина (ЛИГ) обусловлена, с одной стороны, высокой социально-экономической значимостью ротавирусной инфекции (РВИ), а с другой — отсутствием специфических профилактических препаратов.
По заданию ГКНТ Беларуси в ГУ НИИ ЭМ разработан ЛИГ для лечения и экстренной профилактики РВИ у детей. Биологическая схема получения препарата заключается в производстве вирусной биомассы, получении ротавирусного антигена, иммунизации коров и выделении иммуноглобулинов из их молозива. Существенными технологическими особенностями этой разработки являются использование оригинального штамма ротавируса человека, комбинированный метод выделения иммуноглобулинов молозива и стерилизация препарата с помощью ультрафильтрации и радиационного облучения. Сведений о коммерческих аналогах этого препарата нет.
Получены экспериментальные серии ЛИГ для клинических испытаний. Готовая лекарственная форма препарата представляет собой аморфную порошкообразную массу желтовато-белого цвета легкорастворимую в воде. Массовая доля влаги составляет 1,2%. Готовый препарат прозрачный, бесцветный, слегка сладковатый на вкус, рН 7,3. Препарат содержит 4,97% белка, не менее 96% иммуноглобулиновой фракции, хлористого натрия — 0,72% (по ГОСТ 4233–77), этакридина лактата — менее 0,2 мкг/мл, ПЭГ — 0,06%, что соответствует требованиям ГФХ. Сравнительное электрофоретическое исследование ряда иммуноглобулиновых препаратов, в том числе предназначенных для внутривенного введения, показывает высокую степень очистки, гомогенность и отсутствие примесей в ЛИГ. Препарат обладает выраженным противовирусным действием, что подтверждается с помощью иммуноферментного анализа и реакции нейтрализации вируса в культуре клеток. Объем препарата в одном флаконе (одноразовая доза) составляет 10 мл 4,5–5,5% раствора ЛИГ. Сухой препарат растворяется в 10 мл питьевой воды.
Показатели качества ЛИГ противоротавирусного приводятся в таблице.
| Показатели качества | Результаты анализа | Требования к показателям по ВФС |
| Органолептические свойства | Аморфный порошок, желтовато-белого цвета, без запаха, сладковатый на вкус | Аморфный порошок, желтовато-белого цвета, без запаха, сладковатый на вкус |
| Растворимость | В течение 2 мин в 10 мл дистиллированной воды | В течение 5 мин в 10 мл дистиллированной воды |
| Подлинность в реакции иммуноэлектрофореза | Линия преципитации с антисывороткой против Ig коровьего молока | Образование линий преципитации с антисывороткой против Ig коровьего молока |
| Прозрачность на спектрофотометре | ПОП при длине волны 540 ± 10 нм 0,03 (прозрачный) | ПОП при длине волны 540 ± 10 нм не более 0,05 |
| Цветность на спектрофотометре | ПОП при длине волны 400 ± 5 нм 0,08 (бесцветный) | ПОП при длине волны 400 ± 5 нм не более 0,15 |
| РН | 7,3 | Рот 6,5 до 7,5 |
| Массовая доля влаги | 1,2% | Не более 3% |
| Стерильность | Стерилен | Стерилен |
| Токсичность | Не токсичен | Не токсичен |
| Содержание белка | 4,97% | От 4,5 до 5,5% |
| Электрофоретическая однородность | 98% белков иммуноглобулиновой фракции | Не менее 96% белков иммуноглобулиновой фракции |
| Специфическая активность | Титр противоротавирусных антител методом ИФА 1:4000 | Титр противоротавирусных антител методом ИФА не менее 1: 1000 |
| Содержание натрия хлористого | 0,72% | От 0,6 до 0,9% |
| Содержание этакридина лактата | Отсутствие флуоресценции, т.е. менее 0,2 мкг/мл | Не более 0,2 мкг/мл |
| Содержание полиэтиленгликоля | 0,06% | Не более 1,0 ± 0,1% |
НИЦ по разработке и испытаниям новых лекарственных препаратов УП «Диалек» подтверждено соответствие качества препарата проекту ВФС (протокол испытаний № 70/Л).
Доклинические испытания показали, что полученный препарат нетоксичен. Центром экспертиз в здравоохранении противоротавирусный ЛИГ рекомендован для клинических испытаний.
Область применения: профилактическая и клиническая медицина.
Рекомендации по использованию: ЛИГ противоротавирусный предназначен для лечения и экстренной профилактики РВИ у детей.
Предложения по сотрудничеству: выпуск ЛИГ противоротавирусного сдерживается из-за недостаточного внимания к этому вопросу со стороны Министерства здравоохранения. Требуется финансовая поддержка в проведении расширенных клинических испытаний и организации производства. Не решены вопросы