УДК: 616.36–002.1/.2:612.015.348:616.155.25
Год издания: 2003
ХАРАКТЕРИСТИКА ПУЛА СВОБОДНЫХ АМИНОКИСЛОТ ТРОМБОЦИТОВ ПРИ ОСТРОЙ И ХРОНИЧЕСКОЙ HBV-ИНФЕКЦИИ
Кравчук Ю.В., Цыркунов В.М.
Рубрики: 76.29.34, 76.29.50
Гродненский государственный медицинский университет
Тема НИР: «Совершенствование диагностики и лечения вирусных и алкогольных поражений печени».
Сроки выполнения НИР: январь 1999 г. — декабрь 2001 г.
Научный руководитель: д-р мед. наук, проф. В.М. Цыркунов.
Цель исследования — изучение пула свободных аминокислот тромбоцитов (САТ) при разных формах HBV-инфекции.
Наличие на тромбоцитах рецепторов к Fc-фрагменту антител предопределяет их широкое участие в иммунных реакциях. Исследований, посвященных определению биохимической активности тромбоцитов в инфекционном процессе и в иммунных реакциях, практически нет.
Обследовано 113 больных разными формами HBV-инфекции, из них в 1-ю группу вошли больные острым гепатитом В (ОГВ) — 58 человек, во 2-ю группу — больные хроническим гепатитом В (ХГВ) умеренной активности — 12 человек, а также ХГВ низкой активности — 17 человек, в 3-ю группу — 26 пациентов с персистирующей HBs-антигенемией, 4-я группа была представлена 19 здоровыми донорами.
Тромбоциты получали из цельной крови вен предплечья по методике Е.П. Иванова (1991). САТ определяли на автоанализаторе ААА-339 («Миротехника», Прага) по методу Бенсона.
Исследования показали, что большинство САТ реагируют на инфекционный процесс при ОГВ, а в динамике болезни претерпевают определенные изменения (табл. 1). При поступлении в стационар были значительно увеличены концентрации цистеиновой кислоты, таурина, серина, глутаминовой кислоты, пролина, глицина, аланина, изолейцина, тирозина, этаноламина, а содержание аспарагиновой кислоты было значительно снижено по сравнению со здоровыми лицами (p < 0,05). Через 10 дней концентрация их значительно не изменялась (p < 0,05), а к моменту выписки из стационара снижалась. Через 1 мес. уровни цистеиновой кислоты, таурина, серина, глутаминовой кислоты, глутамина, этаноламина всё еще отличались от показателей контрольной группы (р < 0,05), в то же время общеклинические биохимические показатели уже не превышали нормальные величины (общий билирубин — 11,25 ± 3,174 мкмоль/л, АлАТ — 0,3517 ± 0,1228 ммоль/л). Полное восстановление всех показателей САТ отмечалось через 2 мес. после выписки больных из стационара.
Таблица 1
Уровни свободных аминокислот тромбоцитов (мкмоль/г) у больных острым вирусным гепатитом В
Показатель | Здоровые доноры | Больные | ||||
при поступлении | через 10 дней | при выписке | 1 мес. после выписки | 2 мес. после выписки | ||
Цистеат | 0,088 ± 0,0155 | 0,3298 ± 0,0480* | 0,3069 ± 0,0288* | 0,2339 ± 0,0332* | 0,1633 ± 0,0299* | 0,0729 ± 0,0179 |
Таурин | 5,2855 ± 0,5568 | 13,9642 ± 0,857* | 13,3933 ± 1,270* | 12,031 ± 3,1508* | 9,6537 ± 2,1615* | 4,6679 ± 1,8051 |
Фосфоэтаноламин | 0,3615 ± 0,0754 | 3,5298 ± 1,060 | 2,2633 ± 0,7008 | 1,7779 ± 0,824 | 1,7450 ± 0,992 | 0,546 ± 0,992 |
Аспартат | 3,5871 ± 0,7532 | 1,3329 ± 0,2667* | 1,6879 ± 0,3726* | 1,4717 ± 0,3756 | 4,4224 ± 1,528 | 3,5176 ± 1,1914 |
Треонин | 1,6937 ± 0,3677 | 1,2383 ± 0,2639 | 1,3607 ± 0,1963 | 1,4867 ± 0,4284 | 2,4152 ± 0,7165 | 1,8778 ± 0,3572 |
Серин | 0,2456 ± 0,0342 | 1,5868 ± 0,3315* | 1,5986 ± 0,2555* | 1,7024 ± 0,5982* | 0,8036 ± 0,2007* | 0,3525 ± 0,0043 |
Глутамат | 0,9463 ± 0,1848 | 3,1606 ± 0,3076* | 3,2691 ± 0,3226* | 2,4156 ± 0,5825 | 2,5790 ± 0,4107* | - |
Глутамин | 0,2409 ± 0,0479 | 1,0418 ± 0,2498 | 0,827 ± 0,1322 | 1,1712 ± 0,637 | 0,7623 ± 0,0672* | - |
Пролин | 0,9316 ± 0,0959 | 4,7825 ± 0,9379* | 4,8417 ± 0,6919* | 5,7951 ± 1,5109* | 2,6834 ± 1,298 | 0,8087 ± 0,3886 |
Глицин | 0,8858 ± 0,1587 | 2,1443 ± 0,3009* | 1,9719 ± 0,2965* | 2,15 ± 0,5712* | 1,1615 ± 0,2535 | 0,7012 ± 0,0486 |
Аланин | 0,8113 ± 0,1652 | 2,8671 ± 0,6134* | 2,3987 ± 0,4146* | 3,2686 ± 1,2079* | 1,2118 ± 0,3748 | 0,6054 ± 0,1115 |
Валин | 0,6801 ± 0,1495 | 1,0852 ± 0,2363 | 1,0695 ± 0,1857 | 1,2494 ± 0,3884 | 0,7439 ± 0,2061 | 0,4185 ± 0,0833 |
Метионин | 0,2206 ± 0,0475 | 0,4035 ± 0,0728 | 0,3909 ± 0,0687 | 0,4818 ± 0,1971 | 0,3361 ± 0,0684 | 0,2282 ± 0,0525 |
Изолейцин | 0,3956 ± 0,0976 | 0,9866 ± 0,2370* | 0,8859 ± 0,1449* | 1,1846 ± 0,2761* | 0,5310 ± 0,2215 | 0,1621 ± 0,0002 |
Лейцин | 0,8373 ± 0,1825 | 1,8057 ± 0,4127 | 1,6533 ± 0,2706 | 2,4881 ± 0,9174* | 0,9922 ± 0,3268 | 0,5542 ± 0,0154 |
Тирозин | 0,2936 ± 0,0537 | 0,6808 ± 0,0926* | 0,5346 ± 0,0755* | 0,6826 ± 0,2118* | 0,3916 ± 0,0847 | 0,2623 ± 0,0579 |
Фенилаланин | 0,3274 ± 0,0707 | 0,5705 ± 0,1301 | 0,5202 ± 0,1021 | 0,6493 ± 0,2397 | 0,4101 ± 0,1349 | 0,2682 ± 0,0191 |
Этаноламин | 0,5731 ± 0,0669 | 1,2012 ± 0,2010* | 1,0768 ± 0,1295* | 1,4633 ± 0,3014* | 1,0496 ± 0,2775* | 0,5754 ± 0,1339 |
Орнитин | 0,2585 ± 0,0572 | 0,3082 ± 0,0636 | 0,3115 ± 0,0402 | 0,5162 ± 0,1181* | 0,2583 ± 0,0598 | 0,2872 ± 0,1468 |
Лизин | 0,8927 ± 0,1979 | 1,4949 ± 0,3842 | 1,3026 ± 0,2159 | 1,8554 ± 0,4403* | 0,9653 ± 0,2162 | 0,6505 ± 0,11 |
Гистидин | 0,4272 ± 0,0922 | 0,348 ± 0,0676 | 0,3201 ± 0,049 | 0,4753 ± 0,1531 | 0,4023 ± 0,1644 | 0,3029 ± 0,0471 |
*достоверная разность со здоровыми донорами (р < 0,05)
В табл. 2 представлены показатели фонда САТ при хронических формах HBV-инфекции. Из представленных данных видно, что у всех больных значительно повышены концентрации цистеиновой кислоты, таурина, фосфоэтаноламина, серина, аспарагина, глутамата, глутамина, валина, тирозина, этаноламина, а концентрация аспартата существенно снижена по сравнению с контролем (р < 0,05). При сравнении показателей САТ в группах между собой существенных различий не выявлено.
Таблица 2
Показатели САТ (мкмоль/г) у больных разными формами HBV-инфекции
Показатель | Здоровые доноры | ХВГВ умеренной активности | ХВГВ низкой активности | Персистирующая HBs-антигенемия |
Цистеат | 0,1036 ± 0,0118 | 0,3249 ± 0,025* | 0,4037 ± 0,0581* | 0,3354 ± 0,0382* |
Таурин | 5,9898 ± 0,4819 | 13,2519 ± 1,177* | 16,2031 ± 2,014* | 13,872 ± 1,859* |
Фосфоэтаноламин | 0,389 ± 0,0383 | 1,8233 ± 0,4082* | 1,7151 ± 0,2616* | 1,4758 ± 0,3433* |
Аспартат | 2,0394 ± 0,5283 | 0,6479 ± 0,0673* | 0,7206 ± 0,0723* | 0,8759 ± 0,0934 |
Треонин | 1,3229 ± 0,2562 | 0,695 ± 0,0437 | 0,7604 ± 0,0637 | 0,7714 ± 0,0573 |
Серин | 0,5459 ± 0,0991 | 0,9269 ± 0,0683* | 1,1032 ± 0,0956* | 1,0728 ± 0,0665* |
Аспарагин | 0,1559 ± 0,026 | 0,3432 ± 0,0435* | 0,4657 ± 0,0816* | 0,3281 ± 0,0417* |
Глутамат | 1,4637 ± 0,1506 | 2,765 ± 0,2051* | 3,3288 ± 0,3933* | 3,1003 ± 0,2406* |
Глутамин | 0,3884 ± 0,0436 | 1,1165 ± 0,1862* | 1,3756 ± 0,2139* | 1,1643 ± 0,1807* |
Пролин | 0,7582 ± 0,0828 | 0,8414 ± 0,1229 | 0,6881 ± 0,0899 | 1,0832 ± 0,2088 |
Глицин | 0,9454 ± 0,1058 | 1,0569 ± 0,0716 | 1,1977 ± 0,0942 | 1,2089 ± 0,0785 |
Аланин | 0,8955 ± 0,1093 | 1,1654 ± 0,0554 | 1,3378 ± 0,0987* | 1,3813 ± 0,0781* |
Валин | 0,604 ± 0,0767 | 0,8898 ± 0,0894* | 1,0585 ± 0,0864* | 1,0444 ± 0,1203* |
Метионин | 0,2156 ± 0,026 | 0,1985 ± 0,0194 | 0,2664 ± 0,0282 | 0,2045 ± 0,0232 |
Изолейцин | 0,3139 ± 0,0511 | 0,2311 ± 0,0236 | 0,2578 ± 0,0253 | 0,2413 ± 0,0252 |
Лейцин | 0,764 ± 0,0993 | 0,6573 ± 0,0645 | 0,8265 ± 0,1014 | 0,6293 ± 0,0638 |
Тирозин | 0,2821 ± 0,0342 | 0,5116 ± 0,0663* | 0,6124 ± 0,0831* | 0,7599 ± 0,1306* |
Фенилаланин | 0,2908 ± 0,0405 | 0,3743 ± 0,0347 | 0,4554 ± 0,0439* | 0,4303 ± 0,0534* |
Этаноламин | 0,3662 ± 0,0554 | 0,8547 ± 0,1139 * | 1,146 ± 0,1688* | 1,2361 ± 0,2573* |
Орнитин | 0,1576 ± 0,0293 | 0,1966 ± 0,0281 | 0,2839 ± 0,032* | 0,2588 ± 0,0353* |
Лизин | 0,732 ± 0,1143 | 0,5903 ± 0,0422 | 0,6629 ± 0,0459 | 0,6306 ± 0,0459 |
Гистидин | 0,2964 ± 0,0505 | 0,207 ± 0,019 | 0,2517 ± 0,0237 | 0,2116 ± 0,0207 |
*достоверная разность со здоровыми донорами (р < 0,05)
Отличия установлены только при сопоставлении уровней САТ больных ОГВ и хроническими формами HBV-инфекции, причем содержание аспартата, треонина, серина, пролина, глицина, аланина, метионина, изолейцина, лейцина, орнитина, лизина, гистидина при хронических формах инфекции было снижено (р < 0,05).
Изменения уровней САТ в динамике при ОГВ и хронических формах HBV-инфекции свидетельствуют об участии тромбоцитов в инфекционном процессе. Проводимый динамический контроль за изменением содержания и сроками восстановления САТ могут быть использованы для определения полноты выздоровления и прогноза неблагоприятного исхода ОГВ (переход в хроническую форму). Различия, выявленные в формировании пула САТ при хронических вариантах HBV-инфекции, позволяют дифференцировать острые и хронические формы HBV-инфекции. Всё это дает основание признать тромбоцит тест-объектом для контроля за динамикой инфекционного и иммунологического процессов при разных формах HBV-инфекции.
Вид патентной защиты: патент № 4762; срок действия патента — постоянно; патентовладелец — государственное высшее учебное учреждение «Гродненский государственный медицинский университет».
Область применения: инфектология, гепатология, иммунология, биохимия.
Рекомендации по использованию: ранняя диагностика хронического гепатита.
Предложения по сотрудничеству: продажа лицензии; консультативная помощь при внедрении; совместные исследования САТ при инфекционной и неинфекционной патологии.