![]() |
УДК: 616–074/078:615.47
Год издания: 2003
НОВЫЕ ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ЛАБОРАТОРНО-ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ТЕСТ-СИСТЕМЫ ДЛЯ ВЫПОЛНЕНИЯ КЛИНИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
Крутилина Н.И., Костецкая Т.В., Жаврид Э.А.
Рубрики: 76.35.33
Белорусская медицинская академия последипломного образования
Тема НИР: «Разработать лабораторно-диагностические тест-системы и освоить производство наборов реагентов для определения активности гамма-глутамилтранспептидазы, билирубина, холестерина, фосфора, магния, железа, общей и латентной железосвязывающей способности сывор
Сроки выполнения НИР: октябрь 2001 г. — декабрь 2002 г.
Научный руководитель: д-р мед. наук, проф. В.С. Камышников, д-р хим. наук, проф. Е.М. Рахманько.
Соисполнители: БГУ.
Цель работы — создание наборов реагентов для определения активности гамма-глутамилтранспептидазы, содержания билирубина, общего холестерина, холестерина липопротеинов высокой плотности, неорганического фосфора, магния, железа, общей и латентной железосвязывающей способности сыворотки крови ручным способом и с использованием биохимических автоанализаторов.
Гамма-глутамилтранспептидаза — фермент, локализующийся в наружной мембране клеток желчных путей, клеток печени и других органов. Увеличение его активности наблюдается при обтурационной желтухе, гепатитах, опухолях печени, панкреатите, раке поджелудочной железы, хроническом гломерулонефрите, амилоидозе почек, инфаркте миокарда, алкоголизме.
Разработана зарегистрированная МЗ РБ тест-система определения активности гамма-глутамилтранспептидазы методами кинетического и конечноточечного анализа с использованием в качестве субстрата L-гамма-глyтaмил-4-нитpoaнилида.
Магний — внутриклеточный катион, оказывающий существенное влияние на состояние метаболических процессов. Изменение содержания магния в плазме (сыворотке) крови отмечается при почечной недостаточности, эссенциальной гипертонии, прогрессирующем атеросклерозе, онкологических заболеваниях, панкреатите, циррозе печени, хроническом алкоголизме, сердечно-сосудистой недостаточности, эндокринных нарушениях (гипертиреозе, гипофункции паращитовидных желез, гиперальдостеронизме, сахарном диабете), беременности.
В ходе выполнения темы НИР создан зарегистрированный МЗ РБ набор реагентов для определения содержания магния химическим методом, базирующемся на реакции образования окрашенного комплекса с магоном.
Железо — олигоэлемент, являющийся постоянной составной частью гема гемоглобина, окислительно-восстановительных ферментов митохондрий, ферритина и гемосидерина плазмы и тканей. Увеличение содержания сывороточного железа происходит при усиленном высвобождении его из эритроцитов крови (гемолитических анемиях и др.), активизации всасывания через желудочно-кишечный тракт, нарушении процесса включения железа в формирующиеся в костном мозге эритроциты (сидероахрестические анемии, интоксикация свинцом), поражениях печени. Уменьшение концентрации железа в сыворотке крови наблюдается при железодефицитной анемии, а также анемиях, связанных с перераспределением железа в организме.
На определении содержания железа после предварительного насыщения им трансферрина основано установление общей железосвязывающей способности сыворотки крови (ОЖСC), являющейся показателем концентрации трансферрина — транспортного белка, переносящего железо.
В основу созданных в ходе выполнения темы НИР тест-систем положен метод, базирующийся на использовании в качестве хромогена трипиридилтриазина. Разработанные наборы реагентов для определения содержания сывороточного железа и ОЖСС зарегистрированы МЗ РБ.
Создан набор реагентов, позволяющий определять содержание неорганического фосфора в минимальном объеме (10 мкл) сыворотки крови. Неорганические фосфат-ионы в кислой среде в присутствии детергента образуют с молибденовой кислотой фосфорномолибденовую кислоту, обладающую способностью поглощать свет в ультрафиолетовой области спектра. При выполнении исследования отпадает необходимость применения восстановителей в качестве дополнительных компонентов.
Разработанная лабораторно-диагностическая тест-система расширит возможности выполнения исследований в педиатрической практике, в частности для диагностики рахита, спазмофилии, оценки состояний, связанных с поражением почек, костной ткани и др.
Билирубин — продукт распада гема гемоглобина, увеличение уровня которого в плазме (сыворотке) крови наблюдается при усиленном распаде эритроцитов в кровяном русле (гемолитической анемии), а также при гепатитах, застое желчи в печени (механической, или обтурационной желтухе), конституциональных гипербилирубинемиях.
Создан набор зарегистрированный МЗ РБ реагентов, позволяющий реализовать метод Маллоя и Эвелин, особенно удобный для выполнения автоматизированных исследований содержания билирубина в небольших объемах сыворотки крови.
Холестерин — важный компонент плазмы и клеточных мембран, определение которого важно для диагностики патологических состояний, сопровождающихся гипер- и гипохолестеринемией. HDL-холестерин — холестерин липопротеинов высокой плотности, или альфа-холестерин, уровень которого отражает содержание антиатерогенных липопротеинов (уменьшающийся при атерогенных нарушениях в организме).
Созданы зарегистрированные МЗ РБ наборы реагентов для ферментативного определения содержания общего холестерина плазмы (сыворотки) крови и липопротеинов высокой плотности (по Триндеру). Для осаждения апо-В-липопротеинов использован полиэтиленгликоль (со средней молекулярной массой 6000 Д), применение которого повышает надежность аналитического исследования, упрощая ход его выполнения.
Производство разработанных наборов реагентов осуществляется на базе НТПК «Анализ Х».
Область применения: клиническая лабораторная диагностика.
Рекомендации по использованию: тест-системы могут применяться в ЛПУ РБ.
Предложения по сотрудничеству: консультативная помощь при внедрении, использовании материалов при проведении занятий с врачами на кафедре клинической лабораторной диагностики БелМАПО.