Диско-диффузионный метод определения антибиотикочувствительности бактерий является наиболее распространенным и доступным для микробиологических лабораторий. Однако для получения с его помощью воспроизводимых результатов необходима строгая стандартизация:
– диски из специального картона, содержащие определенное количество антибиотика, сохраняющие свою активность не менее года;
– питательная среда, стандартизованная, сохраняющая свои характеристики не менее года;
– порядок и техника проведения исследования;
– учет и оценка результатов.

Наиболее важным элементом стандартизации является питательная среда, в которой происходят два взаимопротивоположных процесса: с одной стороны, диффузия антибиотика, с другой стороны — рост и размножение микроорганизмов. Любое изменение состава среды способно привести к неадекватному результату.

В международной практике широко используется агар Мюллера — Хинтона, рекомендованный ВОЗ. В большинстве лабораторий Беларуси используется среда АГВ российского производства, для которой отсутствуют данные по интерпретации зон задержки роста стандартных микроорганизмов к ряду новых антибиотиков. Среда АГВ не всегда позволяет получать сопоставимые адекватные результаты антибиотикоустойчивости бактерий в связи с несбалансированностью содержания в ней двухвалентных катионов Са²⁺, Mg²⁺, Zn²⁺, тимина и тимидина.

Цель исследования — разработка и производство питательной среды для определения чувствительности бактерий к противомикробным препаратам.

Материалом исследования служили клинические изоляты, полученные от больных инфекционной клинической больницы г. Минска и эталонные штаммы E. coli ATCC 25922, S. aureus ATCC 25923, и Ps. aeruginosa ATCC 27853.

Использовали диски с антибиотиками производства НИИ ЭМ (Россия, Санкт-Петербург) и тест-систему «ЭнтероСенс-тест» (НИИ ЭМ, Беларусь, Минск).

Проведены исследования вариантов состава питательной среды для определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам. В результате была изготовлена среда — аналог агара Мюллера — Хинтона.

Определение чувствительности энтеробактерий к антибиотикам и учет результатов проводили согласно общепринятой методике и прилагаемым инструкциям.

Таблица 1

Диаметры зон задержки роста эталонных штаммов на изучаемых средах

В табл. 1 приведены результаты, полученные при сравнительном изучении зон задержки роста эталонных штаммов на средах АГВ (Россия) и агаре Мюллера — Хинтона (НИИ ЭМ, Беларусь, Минск). Из табл. 1 следует, что среда Мюллера — Хинтона агар производства НИИ эпидемиологии и микробиологии (Минск, Беларусь) является удовлетворительной по качеству, так как диаметр зон ингибиции роста референтных штаммов вокруг дисков с антибиотиками соответствует пограничным значениям, тогда как пределы колебаний зон задержки роста на среде АГВ не укладывались в допустимые.

При сравнительном испытании коммерческих дисков производства Санкт-Петербургского НИИ ЭМ (Россия) и дисков «ЭнтероСенс-тест» (НИИ ЭМ, Минск, Беларусь) на среде агар Мюллера — Хинтона производства НИИ эпидемиологии и микробиологии (Минск, Беларусь) были получены результаты, приведенные в табл. 2.

Таблица 2

Результаты сравнительного испытания коммерческих дисков и дисков «ЭнтероСенс-тест»

Антибиотик	Исследовано штаммов энтеро-бактерий	Из них по данным коммерческих дисков (НИИ ЭМ, Санкт-Петербург)		Из них по данным дисков «ЭнтероСенс-тест» (НИИ ЭМ, Минск)
		устойчивы, умеренно устойчивы	чувствительны	устойчивы, умеренно устойчивы	чувствительны
Рифампицин	24	24	0	24	0
Гентамицин	24	24	0	24	0
Левомицетин	24	24	0	24	0
Тетрациклин	24	24	0	24	3
Цефалексин	24	24	0	21	3
Ампициллин	24	24	24	21	0
Всего (%)	144	144(100)	138 (95,8)	24	6 (4,2)

Как следует из табл. 2, среди клинических изолятов при использовании коммерческих дисков устойчивыми и умеренно устойчивыми оказались 100% (144 изолята), чувствительных не обнаружено, тогда как при использовании дисков «ЭнтероСенс-тест» лишь 95,8% оказались устойчивыми (138 изолятов), и было установлено 3 изолята, чувствительных к тетрациклину, и 3 изолята, чувствительных к цефалексину (4,2%).

Использование в практическом здравоохранении разработанной среды будет способствовать получению стандартных и воспроизводимых результатов исследований, необходимых как для определения антибиотикочувствительности отдельного штамма, так и для осуществления микробиологического мониторинга устойчивости возбудителей в рамках системы эпидемиологического надзора и предупреждения распространения устойчивых форм микроорганизмов.