УДК: 616-097-071: 57.08.3
Год издания: 2005

ОЦЕНКА ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ ФРАКЦИЙ ПОЛИКЛОНАЛЬНЫХ IGG ЧЕЛОВЕКА

Генералов И.И.
Рубрики: 76.03.55
Витебский государственный медицинский университет
Тема НИР: ФЕРМЕНТАТИВНАЯ АКТИВНОСТЬ ФРАКЦИЙ ПОЛИКЛОНАЛЬНЫХ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ КЛАССА G
Сроки выполнения НИР: 15.04.2003 – 14.04.2005
Научный руководитель: профессор И.И.Генералов
Источник финансирования: грант Белорусского Республиканского фонда фундаментальных исследований № Б03-345 от 15 апреля 2003 г.

Изучение антител и иммуноглобулинов, обладающих собственной каталитической (или абзимной) активностью, представляет собой одно из новых современных направлений в иммунологии. Тем не менее, широкое внедрение в практику моноклональных каталитических антител во многом сдерживается их высокой стоимостью. В свою очередь, наиболее существенным препятствием в использовании поликлональных абзимов является их гетерогенность.

Отсюда целью работы явилась оценка ферментативной активности фракций поликлональных иммуноглобулинов класса G и сывороток крови, полученных после хроматографии на аффинных и ионообменных матрицах, проведенной с целью возможного обогащения каталитических поликлональных иммуноглобулинов.

Первичные препараты абзимов были получены из сывороток больных аутоиммунными заболеваниями (системной красной волчанкой и ревматоидным артритом). Определение абзимной (ДНКазной и амидазной) ферментативной активности проводили разработанными нами микрометодами с использованием отечественного планшетного ридера производства РУП «Витязь» мультискана АИФ М/340.

Отобранные первичные препараты абзимов фракционировались далее на ионообменных матрицах. Поликлональные иммуноглобулины G человека продемонстрировали значительную гетерогенность при хроматографии. Для некоторых препаратов иммуноглобулинов удалось повысить каталитическую эффективность их фракций в 20-30 раз. Таким образом, вариабельность связывания антител с заряженными матрицами может быть использована для разделения их каталитических и некаталитических фракций для получения обогащенных препаратов поликлональных абзимов с более высокой активностью. Такой подход может применяться после первичной очистки каталитических антител, полученных различными методами (например, при иммунизации гаптенами).

Отличительные особенности концентрирования поликлональных абзимов с помощью ионообменной хроматографии:

1. для некоторых каталитических препаратов активность фракций может быть увеличена в 20-30 раз;

2. метод не требует конъюгации сорбента с предварительно синтезированными гаптенами;

3. матрица может быть регенерирована не менее чем 5-10 раз для дальнейшего использования;

4. мягкие условия хроматографии предохраняют абзимы от денатурации.

Патентная защита: подана заявка на получение патента РБ на изобретение «Методика получения обогащенных каталитических фракций поликлональных антител», приоритетная справка № а 20050168 от 21.02.05.


Область применения: биотехнология и медицина
Рекомендации по использованию: разработанные подходы, направленные на обогащение поликлональных абзимных фракций, могут быть использованы в процессе получения поликлональных каталитических антител для медицинских и биологических целей
Предложения по сотрудничеству: совместные исследования по дизайну и получению поликлональных препаратов каталитических антител


в начало med.by баннеры учреждения авторы расширенный поиск
Достижения медицинской науки Беларуси.
Copyright © 1997-2022 НИО РНМБ
Вопросы и комментарии просьба отправлять Администратору сайта