Цель исследования – определить выраженность, механизмы возникновения и роль апоптоза нейронов больших полушарий в онтогенезе и в формировании морфологического субстрата проявлений перинатальных церебральных поражений. Объектом исследования явился аутопсийный головной мозг интранатально погибших плодов (n=16) и новорожденных (n=56) сроками гестации 22-40 недель с периинтравентрикулярными кровоизлияниями (ПИВК) 1-3 степеней и церебральной ишемией.

Использованы морфологический, TUNEL, иммуногистохимический, морфометрический и статистический методы. Апоптотический индекс (АИ) рассчитывался по TUNEL-позитивным нейронам на 100 нейронов 2-6 слоев коры, и выражался в %.

В результате исследования выявлена апоптотическая гибель нейронов 1, 4, 10, 17, 22, 28 и IV полей больших полушарий головного мозга, клеток подкоркового белого вещества, герминативного матрикса, эндотелия сосудов и эпендимоцитов.

Для верификации апоптоза нейронов в 4 и 10 полях неокортекса использован метод TUNEL. Все TUNEL-позитивные клетки имели морфологические признаки апоптоза (рисунок 1). При анализе морфометрических данных установлено, что апоптотическая гибель нейронов данных полей неокортекса плодов снижалась по мере увеличения срока гестации (таблица 1).

Рис 1. Морфологические признаки апоптоза TUNEL-позитивных клеток Таблица 1. Характеристика апоптоза нейронов 4-го и 10-го полей неокортекса плодов

Срок гестации, недели	n	АИ, % (Х±m)
		поле 4	поле 10
22-26	4	0,71±0,03	0,86±0,04
27-31	4	0,53±0,07*	0,81±0,07
32-36	4	0,49±0,07*	0,63±0,04
37-40	4	0,27±0,07	0,41±0,05

* р<0,05 по сравнению с полем 10

У недоношенных новорожденных выявлена зависимость апоптоза нейронов 4 и 10 полей от степени ПИВК (но не от срока гестации): при ПИВК 1 степени соответствующие АИ были достоверно ниже (р<0,05), чем при ПИВК 2 и 3 степеней (таблица 2).

Таблица 2. Характеристика апоптоза нейронов 4-го и 10-го полей неокортекса новорожденных сроками гестации 22-36 недель с ПИВК

Степень ПИВК	n	АИ, % (Х±m)
		поле 4	поле 10
1	7	0,53±0,14*	1,15±0,18
2	15	1,39±0,23*	2,18±0,26
3	16	2,80±0,66	3,98±0,54

* р<0,05 по сравнению с полем 10

Не обнаружено статистически достоверной зависимости интенсивности апоптоза нейронов 4 и 10 полей неокортекса доношенных новорожденных (n=18) с церебральной ишемией от продолжительности жизни и тяжести поражения. АИ поля 4 составил 1,64±0,31%, поля 10 – 1,88±0,32% (р>0,05).

Выявлено позитивное окрашивание с антителами к активной каспазе-3 цитоплазмы (реже ядра) большинства апоптотических нейронов поля 4 (рисунок 2). При проведении корреляционного анализа по Спирмену установлена прямая достоверная средней силы корреляционная связь между АИ поля 4 и индексом экспрессии активной каспазы-3 (r=0,67, р<0,001). Апоптозиндуцирующий фактор определялся в ядрах единичных нейронов поля 4.

Рис 2. Позитивное окрашивание с антителами к активной кспазе-3 фпоптотических нейронов поля 4

Полученные данные свидетельствуют о значимом вкладе апоптоза нейронов коры больших полушарий новорожденных в формирование морфологического субстрата психоневрологических проявлений перинатальных церебральных поражений.

Научно-технический уровень выполненных исследований не только соответствует лучшим зарубежным аналогам, но и по ряду показателей (комплексный подход, количество наблюдений, изучение 4 и 10 полей неокортекса) превосходит их.

Результаты работы могут быть использованы в практической и научно-исследовательской деятельности патологоанатомами, неонатологами, неврологами, педиатрами, гистологами и эмбриологами.

Результаты исследования внедрены в преподавание на курсе патологической анатомии (кафедра клинической лабораторной диагностики) БелМАПО; в работу Центральной научно-исследовательской лаборатории БелМАПО и отделения детской патологии лечебно-профилактического учреждения особого типа «Патологоанатомическое бюро» г. Минска.