Принципы индивидуализации терапии лейкозов предусматривают выбор протокола терапии не только в соответствии с клиническим статусом и лабораторными показателями, характеризующими морфологические, иммунологические, цитогенетические и молекулярно-биологические особенности лейкозных клеток, но и определение чувствительности этих клеток к цитостатическим препаратам in vitro. При этом для экономически оправданной минимизации числа прогностических показателей, обладающих достаточной информативностью, большое внимание уделяется проведению клинико-лабораторных и лабораторно-лабораторных сопоставлений. С этой целью нами проанализировано соответствие между чувствительностью выделенных из периферической крови больных с В-ХЛЛ (59 наблюдений) лимфоцитов к цитостатическим препаратам и их сочетаниям, входящим в состав протоколов (лейкладин, циклофосфан, дексаметазон и др.), и содержанием в крови апоптотических и пролиферирующих, а также так называемых нормальных Т-клеток.

Чувствительность к цитостатическим препаратам и их сочетаниям определяли с помощью МТТ-теста с использованием разработанной нами шкалы ее оценки. Чувствительность считали низкой, если после воздействия препаратов выживало более 50% клеток. Содержание СD3-положительных лимфоцитов определяли с помощью соответствующих моноклональных антител, содержание спонтанно апоптозирующих и пролиферирующих клеток – по распределению выделенных клеток по фазам клеточного цикла. Оценивали ДНК-гистограмму, полученную путем измерения флуоресценции специфического ДНК-красителя пропидиум иодида на проточном цитофлуориметре. Гиподиплоидные клетки учитывали как апоптотические. Клетки, находящиеся в фазах клеточного цикла S+G2+M, относили к пролиферирующим.

Каждый из показателей сопоставляли с чувствительностью к терапии in vitro отдельно или в комплексе.

Обследованная группа больных, как и следовало ожидать, характеризовалась выраженной гетерогенностью по изучаемым показателям. Так, средние значения (±стандартное отклонение) и 95%-ный доверительный интервал для СD3-положительных клеток составляли 5,81±6,5 (0,2-17,9), для спонтанно апоптозирующих клеток – 3,51±5,7 (0,73-12,4), для пролиферирующих клеток – 7,71±16,2 (0,93-7,1).

Предсказательная низкая чувствительность к терапии оказалась максимально вероятной при сочетании таких количественных показателей, как спонтанный апоптоз менее 1 %, остаточная субпопуляция CD3-положительных лимфоцитов менее 2 % и фракция пролиферирующих клеток менее 3 % при коэффициенте корреляции 0,789 (р<0,01).

Таким образом, совокупность исследованных показателей, характеризующих количественно субпопуляционный состав лимфоцитов пациентов с В-ХЛЛ по данным параметрам, позволяет еще до определения in vitro чувствительности клеток к терапии прогнозировать низкую эффективность стандартных протоколов и иметь в виду необходимость ее коррекции.