УДК: 616.986.7-084:615.371/372
Год издания: 2005

РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ ЛЕПТОСПИРОЗА

Капитулец С.П.Сабынин В.М.Капитулец Н.Н.Остромухова Г.Л.Петкевич А.С.
Рубрики: 76.03.45
Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии
Тема НИР: Разработать технологию получения вакцинных препаратов с целью создания средства специфической профилактики лептоспироза у человека
Сроки выполнения НИР: июль 2001 г. - июнь 2004 г.
Научный руководитель: к.м.н. А.С.Петкевич
Соисполнители: Государственное учреждение «Научно-исследователь-ский институт эпидемиологии и микробиологии»
Источник финансирования: республиканский бюджет

В настоящее время в республике не производятся вакцины для профилактики лептос-пироза у людей. В то же время вероятность заражения лептоспирозом, особенно лиц «групп риска», достаточна высока в связи с наблюдающимися изменениями пейзажа возбудителя и активацией природных очагов инфекции. Иктерогеморрагический лептоспироз характеризу-ется наиболее тяжелым клиническим течением, высоким уровнем инвалидизации и летально-сти.

С целью совершенствования мероприятий по специфической профилактике лептоспи-роза нами разработана технология получения очищенного инактивированного лептоспироз-ного антигена, получен экспериментальный образец культуральной очищенной концентриро-ванной инактивированной противолептоспирозной вакцины, проведены ее доклинические испытания.

Работу проводили на основе стандартного штамма L.interrogans, серогруппы Ictero-haemorrhagiae, обладающего широким диапазоном внутриродовых и внутригрупповых анти-генных связей. Возбудитель накапливали в среде Терских, содержащей 3% бараньей сыво-ротки при 370С в течение 12-14 дней. В логарифмической фазе роста культуры лептоспиро-содержащую жидкость собирали, разводили физиологическим раствором (0,89% NaCl), рН-7,2-7,4, в соотношении 1:10 и подвергали последовательному 2-кратному центрифугирова-нию при 2000 об/мин в течение 15 мин и 8000 об/мин в течение 2 часа, при комнатной темпе-ратуре. Полученный осадок суспендировали в физиологическом растворе, рН-7,2-7,4. и инак-тивировали. Концентрацию белка в антигенных препаратах определяли спектрофотометриче-ски при длине волны 280 нм. Полученный антиген (1,5±0,05 мг/0,5 мл) исследовали на полноту инактивации, стерильность, специфичность, реактогенность, токсичность и безвредность для лабораторных животных по стандартным методикам. Иммунный ответ на введение лептос-пирозного антигена изучали на лабораторных животных (беспородные белые мыши, золоти-стые сирийские хомячки, морские свинки) при 1, 2, 3, 5 и 7-кратной схеме иммунизации без и с использованием в качестве адъювантов различных концентраций иммуностимуляторов природного и синтетического происхождения (прополис, апистимулин, ИС-Т, ИС-Л, полиХ) с интервалом между инъекциями 10 и 30 дней.

После I иммунизации лептоспирозным антигеном без адъюванта титры специфиче-ских антител в сыворотке крови животных достигали в реакции микроагглютинации ≤100. II иммунизация приводила к росту титров антител в 4 раза и выше. Увеличении интервала меж-ду иммунизациями с 10 до 30 суток повышало средние значения титров антител в 2-4 раза. При использовании лептоспирозного антигена в комбинации с иммуностимуляторами им-мунный ответ у животных возрастал десятикратно.

Установлено, что применение ИС-Л (в дозе 1,5 мг/мл) при 2-х кратной схеме иммуни-зации вызывает наивысший иммуностимулирующий эффект после каждой инъекции антиге-на. Титры антител на 10 день после II-й иммунизации достигали 1:40960. Индекс нейтрализа-ции составил 3,75 lg (р < 0,01). Отмечена тенденция к снижению стимулирующего эффекта ИС-Л при повышении применяемой дозы иммуностимулятора. Показана 100% защита при заражении вакцинированных животных высокими дозами возбудителя.

Разработанная технология получения антигенного препарата предлагается как основа для создания убитых противолептоспирозных вакцин, содержащих одно-, трех-, пяти-, девя-ти- компонентный антиген возбудителя различных серогрупп лептоспир, актуальных для данной территории, в зависимости от целей и задач, стоящих перед здравоохранением. На получение экспериментального образца вакцины разработан Лабораторный регла-мент и утвержден на Ученом совете института (протокол №6 от 11.06.2004 г.).


Область применения: вакцинопрофилактика.
Рекомендации по использованию: для проведения профилактических мероприятий в очагах лептоспирозной инфекции
Предложения по сотрудничеству: производство экспериментальных серий вакцины для проверки ее эффективности в клинических испытаниях на людях


в начало med.by баннеры учреждения авторы расширенный поиск
Достижения медицинской науки Беларуси.
Copyright © 1997-2019 НИО РНМБ
Вопросы и комментарии просьба отправлять Администратору сайта