|
УДК: 616.6-022-085.33:577.213.3
Год издания: 2006
ВЫЯВЛЕНИЕ В ДНК ВОЗБУДИТЕЛЕЙ TET И ERM ГЕНОВ, ОПРЕДЕЛЯЮЩИХ УСТОЙЧИВОСТЬ К АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫМ ПРЕПАРАТАМ ГРУППЫ ТЕТРАЦИКЛИНА И МАКРОЛИДАМ МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ (ПЦР)
Хулуп Г.Я., Костюк С.А., Бадыгина Н.А.
Рубрики: 76.35.33
Белорусская медицинская академия последипломного образования
Тема НИР: Изучение этиологических особенностей бактериальных и вирусных микст-инфекций при инфекционной и соматической патологии урогенитального и желудочно-кишечного трактов для дальнейшего совершенствования технологии диагностики инфекционных заболеваний методом п
Сроки выполнения НИР: 2002–2005 гг.
Научный руководитель: д-р мед. наук, проф. Г.Я. Хулуп.
Источник финансирования: государственный бюджет Республики Беларусь
Цель работы – разработка методических подходов оценки устойчивости Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum к антибиотикам группы тетрациклина (тетрациклин, доксициклин, метациклин, моноциклин) и макролидам (эритромицин, кларитромицин, рокситромицин, ровамицин), используя метод ПЦР.
Для выявления тетрациклинустойчивых штаммов урогенитальных возбудителей, применяли праймеры, амплифицирующие последовательности генов устойчивости к тетрациклинам tet-M и tet-O: Tet1 – 5-AGT TCC ACC GAA TCC TTT CTG GGC TTC-3 (праймер 1); Tet2-5-TTC TTG AAT ACA CCG AGC AGG GAT TTC TCC-3 (праймер 2).
С целью обнаружения микроорганизмов, устойчивых к макролидам, использовали праймеры к участкам ДНК, кодирующим консервативные нуклеотидные последовательности erm-генов, детерминирующих синтез метилтрансфераз:Erm1 5- TGA AAG CCA TGC GTC TGA CATC -3 (праймер 1); Erm2 5-TTG GCG TGT TTC ATT GCT TGAT-3 (праймер 2).
Для подтверждения достоверности результатов бактериологическим методом (БМ) были проведены параллельные исследования на антибиотикоустойчивость микроорганизмов. При сопоставлении результатов ПЦР и БМ на устойчивость-чувствительность возбудителей к тетрациклинам было установлено, что совпадение наблюдалось в 83+/-6,3% случаев, при выявлении макролидустойчивых возбудителей - 85,7+/-5,9% случаев.
Таким образом, адаптирована для практического здравоохранения методика выявления специфических генов устойчивости возбудителей урогенитальных инфекций Mycoplasma hominis, и Ureaplasma urealyticum к антибиотикам группы тетрациклина и макролидам на основе выявления Tet- и Erm- генетических детерминант в генетическом материале микроорганизмов. Анализ наличия в ДНК микроорганизмов, генетических детерминант, определяющих устойчивость к антибиотикам позволяет изменить подходы к выбору этиотропных препаратов.
Положительные решения о выдаче патентов РБ на изобретения:
1. «Способ определения устойчивости возбудителей урогенитальной инфекции Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis или Ureaplasma urealyticum к природному или полусинтетическому антибиотику тетрациклинового ряда» № 20030986 от 08.06.2006 г.;
2. «Способ определения устойчивости возбудителей урогенитальной инфекции Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis или Ureaplasma urealyticum к природному или полусинтетическому 14- или 15-членному антибиотику группы макролидов» № 20030987 от 08.06.2006
Область применения: урология, гинекология, инфекционные заболевания.
Результаты внедрены в практическое здравоохранение в ЛПУ г. Минска: ГУ «Минский городской кожно-венерологический диспансер», ГУ «Родильный дом № 2» г. Минска, ГУ 25-я поликлиника г. Минска.
Предложения по сотрудничеству: будем благодарны за участие во внедрении в Городском клиническом кожно-венерологическом диспансере, Минском областном кожно-венерологическом диспансере, Минском консультативно-диагностическом центре