Семейная гиперхолестеринемия, вызванная нарушениями в структуре белка аполипопротеина В-100 (апоВ100), является наследственной аутосомно-доминантной формой первичной гиперхолестеринемии (ПГ), при которой значительно повышается уровень липопротеинов низкой плотности (ЛПНП). В нормальных клетках рецепторы взаимодействуют с лигандом апоВ100 на поверхности ЛПНП, после чего интактная форма липопротеина захватывается клеткой путем эндоцитоза. Нарушение захвата ЛПНП в печени приводит к его накоплению в других органах и тканях. Данный биохимический дефект в большинстве случаев вызван мутациями в гене APOB, который кодирует синтез белка апоВ100.

В настоящее время описано несколько различных вариантов гена АРОВ, которые приводят к определенным клиническим проявлениям. Один из самых частых - это вариант, связанный с точечной мутацией в кодоне 3500 (Arg3500Gln). Мутация R3500Q представляет собой замену гуанидина на аденин в позиции 10708 гена APOB, что приводит к аминокислотной замене аргинина3500 на глютамин в белковом домене, который отвечает за прикрепление липопротеина к ЛПНП–рецепторам.

Для идентификации мутации R3500Q в гене APOB нами отработана технология с использованием принципа ARMS (amplification refractory mutation system, аллель–специфическая ПЦР). По данной методике ПЦР выполняется с тремя праймерами (3500F, 3500R, 3500M) амплифицирующими ДНК фрагмент гена АРОВ размером 334 п.н. в нормальных аллелях и фрагмент 167 п.н. в аллелях с мутацией. Для анализа ПЦР продуктов используется электрофорез в 8%-ом полиакриламидном геле с последующим окрашиванием бромистым этидием.

Поиск мутации R3500Q проведен в трех группах:

– пациенты с ПГ – 72 человека;

– пациенты с ишемической болезнью сердца (ИБС) – 98 человек;

– контрольная группа – 350 человек.

По результатам молекулярно–генетического анализа данная мутация идентифицирована у одного пациента с ПГ и у двух – с ИБС. Характеристика пациентов приведена в таблице.

Таблица

Характеристика пациентов, у которых выявлена мутация R3500Q

Пациент	Диагноз	Генотип	Холестерин (мМ/л)	ЛПНП (мМ/л)	Возраст
1	ПГ	R3500Q/N	9,31	6,4	54
2	ИБС	R3500Q/N	7,8	5,92	41
3	ИБС	R3500Q/N	8,3	5,5	54

Обнаружение мутации свидетельствует о том, что причиной заболевания у этих лиц является наследственный дефект аполипопротеина В. Высокий уровень холестерина и ЛПНП соответствует имеющимся в литературе данным об аналогичных показателях у гетерозиготных носителей мутации R3500Q.

По результатам исследования гена APOB в 350 образцах контрольной группы популяции Беларуси мутация R3500Q не выявлена.

Внедрение методов ДНК-анализа и идентификации мутации R3500Q в гене АРОВ, позволит проводить раннюю диагностику семейной гиперхолестеринемии, с установлением первопричины заболевания, пренатальную и предимплантационную диагностику. Выявление каждого нового случая заболевания также даст возможность определить, является ли кто-либо из родственников пациента носителем мутации, и начать своевременную профилактику. Такой подход, известный как каскадный семейный скрининг, является более эффективным, чем общий или селективный скрининг.