УДК: 577.112
Год издания: 2007
ПОЛУЧЕНИЕ РЕКОМБИНАНТНОГО ЭНТЕРОВИРУССПЕЦИФИЧЕСКОГО БЕЛКА
Дедюля К.Л., Поклонская Н.В., Безручко А.А., Казинец О.Н., Богуш З.Ф., Амвросьева Т.В.
Рубрики: 34.15.31, 76.29.53
Научно-исследовательский институт эпидемиoлогии и микробиологии
Тема НИР: Получить энтеровирусспецифический рекомбинантный белок для создания на его основе диагностической тест-системы
Сроки выполнения НИР: октябрь 2004 г. – декабрь 2006 г.
Научный руководитель: д-р мед. наук, проф. Т.В. Амвросьева
Источник финансирования: госбюджет
Одним из подходов к повышению чувствительности диагностических тест-систем на базе ИФА является модификация входящих в их состав антигенных препаратов методами генетической инженерии, что может быть достигнуто путем разработки рекомбинантных белков, содержащих антигенные эпитопы структурных и/или неструктурных энтеровирусных полипептидов. Исходя из этого, целью настоящей работы являлось получение перекрестнореагирующего рекомбинантного энтеровирусспецифического белка для создания на его основе диагностической ИФА тест-системы нового поколения.
Для достижения поставленной цели нами был клонирован, экспрессирован и очищен общий энтеровирусный антигенный эпитоп (common epitope, СЕ), расположенный в пределах N-концевой области белка VP3 и C-концевой области белка VP1 вируса ЕСНО 6, и обозначенный нами как CE/E6. Исследование антигенных свойств рекомбинантного белка CE/E6 показало, что по активности связывания ЭВ-специфических антител рекомбинантный белок не уступал цельновирионному. При исследовании диагностической чувствительности и специфичности рекомбинантного белка было показано, что по сравнению с цельновирионным энтеровирусным антигеном диагностическая специфичность рекомбинантного белка составила 100%, диагностическая чувствительность – 60%, а диагностическая эффективность в целом – 91%.
Полученные результаты свидетельствуют о наличии у рекомбинантного энтеровирусспецифического белка CE/E6 антигенных свойств и перекрестной реактивности с антителами к различным серотипам ЭВ. Они указывают на возможность использования рекомбинантного белка CE/E6 в качестве антигенного компонента для разработки тест-систем ИФА, направленных на выявление антиэнтеровирусных IgM в клиническом материале больных.
Область применения: вирусология, эпидемиология
Рекомендации по использованию: рекомбинантный энтеровирусспецифический белок CE/E6 используется для создания на его основе ИФА тест-системы нового поколения
Предложения по сотрудничеству: консультативная помощь по созданию диагностических ИФА тест-систем на основе рекомбинантных белков