Т-лимфоциты-хелперы 2-го типа (Тh2) играют важную роль в инициации, прогрессировании и персистенции аллергических заболеваний, включая бронхиальную астму (БА). Однако недостаточно известно об иммунорегуляторных механизмах, определяющих восприимчивость к БА, тяжесть ее течения и уровень контроля над заболеванием. В настоящее время естественные регуляторные Т-клетки занимают центральное место как решающие иммунорегуляторные клетки, способные к супрессии Тh1 и Тh2-опосредованных иммунных ответов. Наиболее серьезно обосновано наличие регуляторных функций у субпопуляции CD4+-Т-клеток, экспрессирующих -цепь рецептора IL-2 (CD25). У человека функции естественных регуляторных Т-клеток выполняют не все CD4+CD25+-лимфоциты, а только их фракция с высоким уровнем экспрессии CD25 (CD4+CD25hi-клетки).

Цель исследования - оценить состояние Т-регуляторного звена иммунной системы и активность воспаления у больных бронхиальной астмой с разными уровнями контроля над заболеванием по количеству естественных регуляторных Т-клеток (CD4+CD25hi) и активированных клеток (CD25+).

В исследование включены 48 больных с обострением БА, 21 больной с неконтролируемой БА, 27 больных с контролируемой БА (полный и частичный контроль) и 30 практически здоровых лиц (группа контроля).

У больных БА и у лиц контрольной группы утром натощак производили забор крови из локтевой вены в объеме 2-4 мл в пробирки с гепарином (из расчета 20 ЕД на 1 мл крови). Определение Т-лимфоцитов (CD3+), Т-лимфоцитов-хелперов (CD4+), активированных клеток (CD25+) и естественных регуляторных Т-клеток (CD4+CD25hi) проводилось на проточном цитофлюориметре FACScan (Becton Dickinson, США). Для идентификации поверхностных маркеров применяли моноклональные антитела (Beckman Coulter, США) к дифференцировочным клеточным антигенам, меченные флюорохромами. Естественные регуляторные Т-клетки определялись как фракция CD4+CD25+-лимфоцитов с высоким уровнем экспрессии CD25 (CD4+CD25hi-клетки). Популяции и субпопуляции лимфоцитов оценивали в гейте лимфоцитов. На пробу анализировалось не менее 30 000 клеток. Учет и анализ данных производился в автоматическом режиме с использованием программы CELLQuest. Статистическую обработку выполняли с использованием пакета прикладных программ Statistica 6,0.

Клинико-иммунологическая характеристика групп больных с разными уровнями контроля над БА и группы практически здоровых лиц представлена в таблице.

Таким образом, при снижении количества естественных регуляторных Т-клеток (CD4+CD25hi) более чем в 4 раза и повышении активированных клеток (CD25+) более чем в 1,5 раза по сравнению с контролем судят о высокой активности воспаления и обострении БА, а показатели количества CD4+CD25hi-клеток ниже контрольных значений на 25% и более и CD25+-клеток выше контрольных значений указывают на умеренную активность воспалительного процесса и на неконтролируемое течение БА; если же количество CD4+CD25hi-клеток не отличается от группы контроля или ниже менее чем на 11%, а количество CD25+-клеток ниже или не отличается от группы контроля, то степень активности воспалительного процесса низкая, а течение БА - контролируемое (полный или частичный контроль).

Проведенные нами исследования впервые демонстрируют взаимосвязь уровней контроля над БА с состоянием Т-регуляторного звена иммунной системы, показывая, что чем ниже количество естественных регуляторных Т-клеток (CD4+CD25hi) в крови, тем выше активность воспаления, количество активированных клеток (CD25+) и хуже контролируется заболевание.

Таблица

Способ позволяет наиболее точно определять степень активности воспалительного процесса при БА, уровень контроля над БА, мониторировать течение болезни и определять индивидуальный текущий объем терапии с целью достижения и поддержания контроля над БА. Полученные данные, с точки зрения наличия и выраженности нарушений Т-регуляции, еще раз указывают на необходимость проведения дифференцированной базисной (поддерживающей) терапии при БА. Кроме этого, способ дает возможность объективизировать клиническую классификацию по уровням контроля над БА. Преимуществом заявленного способа является также его безопасность для пациента, и поэтому лечение можно проводить неоднократно независимо от периода заболевания.