УДК: 616.711-002:616.72-002:616-092-07
Год издания: 2010
Клинико-патогенетическое и диагностическое значение каталитической активности поликлональных иммуноглобулинов и сыворотки крови при спондилоартропатиях
Кундер Е.В., Литвяков А.М.
Рубрики: 76.29.31, 76.29.33
Витебский государственный медицинский университет
Тема НИР: «Разработка критериев диагностики серонегативных артритов с использованием методологии исследования абзимной активности иммуноглобулинов, про- и противовоспалительного потенциала сыворотки крови и синовиальной жидкости, техники ультразвуковой артроскопии»
Сроки выполнения НИР: январь 2006 г. — декабрь 2008 г.
Научный руководитель: д-р мед. наук, проф. А.М. Литвяков
Источник финансирования: госбюджет
Цель исследования - установление при спондилоартропатиях клинико-патогенетической и диагностической значимости каталитической активности поликлональных иммуноглобулинов и сыворотки крови.
Обследовано 266 пациентов со спондилоартропатиями (95 пациентов с псориатическим артритом, 120 - с реактивным, 51 - с анкилозирующим спондилитом) и 69 доноров Витебской областной станции переливания крови. Использованы сыворотка крови и IgG 1, 2 и 4 подклассов, выделенные из сыворотки крови. Препараты IgG из сыворотки крови выделяли комбинированным риванол-аффинно-хроматографическим методом. Определяли ДНКазную (БАПНА - бензоиларгинин-n-паранитроанилид-амидазную), каталазную и супероксиддисмутазную (СОД) активность IgG. ДНКазную и гиалуронидазную активность определяли по методу образования и осаждения сгустка 2-этокси-6,9-диаминоакридина лактата (риванола). Постановка реакции БАПНА-амидазной, каталазной и СОД активности осуществлялась по модифицированным нами методикам. Статистический анализ результатов исследования был выполнен с использованием аналитического пакета Statistica 7.0 и программы MedCalc Statistics 10.2.00.
В результате проведенных исследований у пациентов со спондилоартропатиями доказано наличие поликлональных IgG, обладающих собственной каталитической активностью; при этом уровни и частоты встречаемости положительных результатов определения ДНКазной, протеолитической (БАПНА-амидазной) и СОД активности IgG при изученных заболеваниях статистически высокозначимо (p<0,001) превышают контрольные величины. Установлено превышение уровней и частот встречаемости ДНКазной, БАПНА-амидазной и СОД активности IgG при псориатическом артрите по сравнению с величинами при реактивном артрите и анкилозирующем спондилите. Выявлены высокозначимые различия (p<0,0001) между уровнями и частотами встречаемости сывороточной ДНКазной и гиалуронидазной активности у пациентов с псориатическим артритом по сравнению с реактивным артритом и анкилозирующим спондилитом. Патогенетическую значимость абзимов при спондилоартропатиях подтверждают выявленные взаимосвязи (p<0,05) между уровнями каталитической активности иммуноглобулинов и маркерами активности заболеваний, а также показателями иммунограммы. Об участии антител, обладающих каталитическими свойствами, в развитии воспалительных процессов свидетельствует прямая зависимость уровнем ДНКазной активностью и величиной СОЭ (r=0,42), уровнем С-реактивного белка (r=0,38), числом CD4+ Т-лимфоцитов (r=0,40), ЦИК (r=0,38), БАПНА-амидазной активностью и содержанием CD4+ Т-лимфоцитов (r=0,66), В-лимфоцитов (r=0,46), иммунорегуляторным (r=0,69), фагоцитарным индексом (r=0,59), числом ЦИК (r=-0,33), каталазной активностью и сывороточной концентрацией фибриногена (r=0,57). Клиническую значимость абзимной и сывороточной каталитической активности при изученных вариантах спондилоартропатий подтверждают взаимосвязи (p<0,05) между их величинами и клиническими признаками заболеваний. Обнаруженные взаимосвязи подтверждают участие ДНКазной активности IgG, а также сывороточной ДНКазной и гиалуронидазной активности в развитии воспаления, а также указывают на возможную протективную функцию абзимов, обладающих протеолитической (БАПНА-амидазной) и окислительно-восстановительной активностью.
На основе определения ДНКазной и СОД активности IgG, ДНКазной и гиалуронидазной активности сыворотки крови разработаны тесты дифференциальной диагностики спондилоартропатий и определена степень их полезности путем расчета операционных характеристик. Критериям наиболее ценных диагностических тестов в ревматологии соответствуют тест дифференциальной диагностики псориатического артрита и анкилозирующего спондилита по результатам определения удельной ДНКазной активности IgG и ДНКазной активности IgG на 1 мл сыворотки крови, псориатического артрита и реактивного артрита, псориатического артрита и анкилозирующего спондилита по результатам расчета ДНКазной активности сыворотки крови, а также тесты дифференциальной диагностики псориатического артрита и реактивного артрита, псориатического артрита и анкилозирующего спондилита по результатам определения гиалуронидазной активности сыворотки крови. Критериям полезных диагностических тестов в ревматологии соответствуют тесты дифференциальной диагностики псориатического артрита и реактивного артрита по результатам определения удельной ДНКазной активности IgG и ДНКазной активности IgG на 1 мл сыворотки крови, а также тест дифференциальной диагностики псориатического артрита и анкилозирующего спондилита по результатам расчета СОД активности IgG на 1 мл сыворотки крови.
Область применения: ревматология, клиническая медицина
Рекомендации по использованию: данные тесты являются дополнительными при установлении диагноза в ситуациях, когда клиническая картина псориатического артрита, анкилозирующего спондилита и реактивного артрита не полностью соответствует диагностическим критериям заболеваний. Положительный эффект предлагаемых разработок заключается в получении достоверных объективных показателей дифференциации псориатического артрита от реактивного артрита и анкилозирующего спондилита, что расширяет возможности лабораторной и дифференциальной диагностики спондилоартропатий. Результаты могут применяться в учреждениях здравоохранения. Методы внедрены в практическую деятельность лечебно-профилактических учреждений. Получено 11 актов внедрения и 9 справок о возможном использовании результатов исследования. Разработана и утверждена инструкция по применению «Определение ферментативной (гиалуронидазной и дезоксирибонуклеазной) активности деполимеризующего действия при аутоиммунной и инфекционной патологии (рег. № 014-0407, утв. Минздравом РБ 13.12.07).
Предложения по сотрудничеству: консультативная помощь при внедрении