УДК: 616-002.5-07
Год издания: 2010
Молекулярно-генетический метод в диагностике осложнений вакцинации БЦЖ
Залуцкая О.М., Сагальчик Е.Р., Николенко Е.Н., Скрягина Е.М., Кривошеева Ж.И., Дюсьмикеева М.И.
Рубрики: 76.29.53
Республиканский научно-практический центр пульмонологии и фтизиатрии
Тема НИР: «Изучение особенностей накопления мутаций в генах, ассоциированных с устойчивостью к рифампицину и изониазиду, и разработка методов повышения эффективности диагностики туберкулеза с использованием молекулярно-генетических методов»
Сроки выполнения НИР: январь 2009 г. — декабрь 2010 г.
Научный руководитель: канд. мед. наук Е.М. Скрягина
Соисполнители: УО «Белорусский государственный медицинский университет»
Источник финансирования: госбюджет
Цель исследования - диагностика осложнений вакцинации у детей с использованием молекулярно-генетических методов.
Идентификация вакцинного штамма M.bovis BCG чрезвычайно важна для диагностики осложнений вакцинации у детей, однако дифференцировать вакцинный штамм M.bovis BCG от M.bovis с помощью культуральных и биохимических тестов не представляется возможным. Использование молекулярно-генетического метода GenoType® MTBC (Hain Lifescience) позволяет идентифицировать вакцинный штамм. Исследование проводится посредством гибридизации ДНК изучаемого штамма с набором зондов, один из которых представляет собой фланкирующие регионы делеции RD1, которая присутствует у M.tuberculosis и M.bovis, но отсутствует у M.bovis BCG. Как результат, на нитроцеллюлозном стрипе развивается специфическое окрашивание в виде полосы, которая присутствует у M.bovis BCG, но отсутствует у M.bovis.
Изучены штаммы микобактерий, выделенных из операционного материала у 21 ребенка в возрасте до 1-го года. Пациенты были прооперированы в клинике Центра по поводу осложнений прививки БЦЖ. Среди этих детей у 8 наблюдался левосторонний подмышечный лимфаденит, у 7 - холодный абсцесс левого плеча, у 5 - костно-суставные поражения и 1 ребенок имел гранулему левого плеча. В качестве контроля использовали вакцинный штамм M.bovis BCG. Проведено гистологическое исследование операционного материала (удаленного лимфоузла, капсулы абсцесса). Морфологически обнаружены участки казеозного некроза, окруженные специфической (эпителиоидные клетки, гигантские многоядерные клетки Пирогова-Лангханса) и неспецифической грануляционной тканью. При бактериологическом исследовании операционного материала выделены культуры микобактерий, которые были идентифицированы с использованием тест-системы GenoType® MTBC как M bovis BCG.
Таким образом, результаты исследования с использованием молекулярно-генетического метода позволяют идентифицировать штаммы микобактерий, выделенные из операционного материала детей как M.bovis BCG, и достоверно подтвердить диагноз осложнений БЦЖ-вакцинации.
Область применения: фтизиатрия, микробиология
Рекомендации по использованию: методы могут быть внедрены в бактериологических лабораториях противотуберкулезных учреждений РБ
Предложения по сотрудничеству: консультативная помощь при внедрении