Цель исследования: разработка тест-системы «ИД-АНА» однократного использования, которая предна­значена для определения видовой принадлежности облигатно-анаэробных микроорганизмов в полужид­кой среде после 4-6 ч инкубации. Учёт идентификации возможен визуально или инструментально с помощью анализатора иммуноферментного Ф300ТП и компьюте­ра с программным обеспечением «Microbi».

Стандартные количества бактериальной взвеси вносятся в лунки планшета, содержащего дегидриро­ванные субстраты с индикатором или хромогенные субстраты (мочевина, L-аргинин, 4-нитрофенил-?D-галактопиранозид, 4-нитрофенил-?D-глюкопиранозид, 4-нитрофенил-?D-глюкопиранозид, 4-нитрофенил-?D-глюкуронид, 4-нитрофенил-N-ацетил-?D-глюкозаминид, 4-нитрофенил-?L-фукопиранозид, D-манноза, D-раффиноза, глютаминовая кислота, ка­лия нитрат (потассиум), L-триптофан, 2-нафтилфосфат, L-аргинин-?-нафтиламид, L-пролин-?-нафтиламид, L-лейцин-?-нафтиламид, L-тирозин-?-нафтиламид, L-глицин-?-нафтиламид, L-гистидин-?-нафтиламид, L-серин-?-нафтиламид, пироглютаминат-?-нафтиламид). После инкубации производится визуаль­ный или инструментальный учёт. Штаммы, имеющие ферментативную способность, расщепляют соответ­ствующие субстраты с изменением цвета содержимо­го лунок планшета. При отсутствии ферментативной способности изменения цвета содержимого лунок не происходит.

Тест-системы импортного производства для определения видовой принадлежности анаэробов являются весьма дорогостоящими (до 4 $ на определе­ние), что ограничивает возможность их использования в отечественных бактериологических лабораториях. Одно исследование с помощью «ИД-АНА» системы обходится примерно в 1 $. Временные затраты на ис­следование приемлемы для практического использова­ния в бактериологических лабораториях: постановка чувствительности занимает до 17 мин. для 4 штаммов микроорганизмов, необходимое время инкубации от 18 до 24 ч, учет результатов - до 6 мин. Тест-система со­ответствует по параметру диагностической специфич­ности по сравнению с референс тест-системой, так как процент расхождения результатов не более 10% и по параметру оценки качества и воспроизводимости в се­рии определений чувствительности контрольного об­разца с расчетом различий по точному критерию Фи­шера, так как различия недостоверны (р> 0,05).

Таким образом, разработанная авторами «ИД-АНА» система характеризуется относительной де­шевизной, простотой в изготовлении и эксплуатации. Тест-система позволит улучшить идентификацию ана­эробных микроорганизмов в бактериологических лабо­раториях любого уровня.

Форма внедрения: технические условия - ТУ РБ 300002704. 018 - 2011; подана заявка на патент.