![]() |
УДК: 616.713:617.713-002]:576.3.08
Год издания: 2011
Импрессионная цитология в оценке морфофункциональных изменений роговицы при бактериальном кератите
Волкович Т.К., Самсонова И.В.
Рубрики: 76.29.56
Витебский государственный медицинский университет
Тема НИР: «Роль факторов иммунной защиты слезной жидкости в патогенезе бактериального кератита, его диагностика и иммунокорригирующая терапия»
Сроки выполнения НИР: апрель 2009 г. — март 2011 г
Научный руководитель: Т.К. Волкович
Источник финансирования: фонд фундаментальных исследований Национальной академии наук Беларуси
Цель исследования: определить диагностическую информативность импрессионной цитологии в оценке морфофункциональных изменений роговицы при бактериальном кератите.
Сущность достижения заключается в применении метода импрессионной цитологии в диагностике морфофункциональных изменений роговицы при бактериальном кератите.
Импрессионная цитология выполнена у 75 пациентов с первичной и вторичной формами бактериального кератита на 1,3,7,14 и 30-е сутки наблюдения. Исследование выполняли под местной анестезией (2% раствор лидокаина). Целлюлозо-ацетатный диск разрезали на 4 части. Использовали один сектор диска, который укладывали пинцетом на поверхность роговицы так, чтобы основание располагалось по лимбу, а верхушка в центре язвенно-воспалительного очага. Диск мягко прижимали к поверхности роговицы в течение 5-10 с, после чего его удаляли пинцетом, помещали на предметное стекло вверх клеточным материалом и фиксировали 96%-м раствором этилового спирта. Далее клеточный материал просветляли в ксилоле и окрашивали гематоксилином и эозином. Световую микроскопию выполняли на микроскопе Leica DM2500 при увеличении .100, .200, .400, .1000.
При световой микроскопии клеточных образцов, полученных методом импрессионной цитологии, нами были выделены следующие зоны:
1) язвенно-воспалительная зона непосредственно воспалительного очага;
2) перифокальная (пери - с греч. peri - вокруг, около, focus - очаг) - область, прилежащая к воспалительному очагу шириной 2-3 мм;
3) паралимбальная (пара - с греч. para - возле, при) - зона внутрь от лимба.
Для определения стадии воспалительного процесса проводили оценку количества нейтрофилов, макрофагов, фибробластов, эпителиальных клеток базального типа, эпителиальных клеток с пикнозом ядра, эпителиальных клеток в состоянии митоза.
Оценку репаративной способности эпителия роговицы проводили путем определения количественных соотношений эпителиальных клеток базального типа к эпителиальным клеткам с пикнозом ядра в перифокальной и паралимбальной зонах.
Новизна. Метод импрессионной цитологии впервые применен для оценки морфофункциональных изменений роговицы, стадии воспалительного процесса, репаративной способности эпителия, прогноза продолжительности заживления и выбора оптимального лечения пациентов с бактериальным кератитом.
Преимущества по сравнению с лучшими отечественными и зарубежными аналогами. В настоящее время имеются как инвазивные (биопсия), так и малоинвазивные (мазки-отпечатки предметным стеклом и соскобы тупым шпателем) методы получения клеточного материала роговицы (Сомов Е.Е., 1994; Шаимова В.А., 2002; Bharathi M.J., 2006; Green M.D., 2007). Однако, по ряду причин, они не имеют широкого применения в офтальмологической практике. Учитывая анатомически выпуклую форму роговицы, выполнение мазков-отпечатков предметным стеклом вызывает определенные трудности, в результате чего получить клеточный материал представляется возможным лишь из зоны язвенно-воспалительного дефекта. Метод соскобов тупым шпателем в силу травматичности, имеет ограниченное применение и также позволяет оценивать клеточный материал только зоны язвенно-воспалительного дефекта. В отличие от данных методов диагностики импрессионная цитология является малоинвазивным, легко выполнимым и высокоинформативным способом получения клеточного материала, который позволяет одномоментно взять клеточный материал как из зоны язвенно-воспалительного очага, так и периферии роговицы - перифокальной и паралимбальной зон.
Вид патентной защиты. № 14358 «Способ окрашивания цитологического материала, полученного импрессионным методом».
Область применения: офтальмология.
Рекомендации по использованию: Министерством здравоохранения Республики Беларусь утверждена инструкция по применению № 013-0210 «Оценка морфофункционального состояния роговицы при бактериальном кератите».
Предложения по сотрудничеству: консультативная помощь при внедрении.