Цель исследования: определить диагностическую информативность импрессионной цитологии в оценке морфофункциональных изменений роговицы при бак­териальном кератите.

Сущность достижения заключается в примене­нии метода импрессионной цитологии в диагности­ке морфофункциональных изменений роговицы при бактериальном кератите.

Импрессионная цитология выполнена у 75 пациен­тов с первичной и вторичной формами бактериального кератита на 1,3,7,14 и 30-е сутки наблюдения. Исследо­вание выполняли под местной анестезией (2% раствор лидокаина). Целлюлозо-ацетатный диск разрезали на 4 части. Использовали один сектор диска, который укла­дывали пинцетом на поверхность роговицы так, чтобы основание располагалось по лимбу, а верхушка в цен­тре язвенно-воспалительного очага. Диск мягко прижи­мали к поверхности роговицы в течение 5-10 с, после чего его удаляли пинцетом, помещали на предметное стекло вверх клеточным материалом и фиксировали 96%-м раствором этилового спирта. Далее клеточный материал просветляли в ксилоле и окрашивали гема­токсилином и эозином. Световую микроскопию вы­полняли на микроскопе Leica DM2500 при увеличении .100, .200, .400, .1000.

При световой микроскопии клеточных образцов, полученных методом импрессионной цитологии, нами были выделены следующие зоны:

1) язвенно-воспалительная зона непосредственно воспалительного очага;

2) перифокальная (пери - с греч. peri - вокруг, около, focus - очаг) - область, прилежащая к воспа­лительному очагу шириной 2-3 мм;

3) паралимбальная (пара - с греч. para - возле, при) - зона внутрь от лимба.

Для определения стадии воспалительного процесса проводили оценку количества нейтрофилов, макрофа­гов, фибробластов, эпителиальных клеток базального типа, эпителиальных клеток с пикнозом ядра, эпители­альных клеток в состоянии митоза.

Оценку репаративной способности эпителия рого­вицы проводили путем определения количественных соотношений эпителиальных клеток базального типа к эпителиальным клеткам с пикнозом ядра в перифо­кальной и паралимбальной зонах.

Новизна. Метод импрессионной цитологии впер­вые применен для оценки морфофункциональных из­менений роговицы, стадии воспалительного процесса, репаративной способности эпителия, прогноза продол­жительности заживления и выбора оптимального лече­ния пациентов с бактериальным кератитом.

Преимущества по сравнению с лучшими отече­ственными и зарубежными аналогами. В настоящее время имеются как инвазивные (биопсия), так и мало­инвазивные (мазки-отпечатки предметным стеклом и соскобы тупым шпателем) методы получения клеточ­ного материала роговицы (Сомов Е.Е., 1994; Шаимо­ва В.А., 2002; Bharathi M.J., 2006; Green M.D., 2007). Однако, по ряду причин, они не имеют широкого при­менения в офтальмологической практике. Учитывая анатомически выпуклую форму роговицы, выполне­ние мазков-отпечатков предметным стеклом вызывает определенные трудности, в результате чего получить клеточный материал представляется возможным лишь из зоны язвенно-воспалительного дефекта. Метод соскобов тупым шпателем в силу травматичности, имеет ограниченное применение и также позволяет оценивать клеточный материал только зоны язвенно-воспалительного дефекта. В отличие от данных мето­дов диагностики импрессионная цитология является малоинвазивным, легко выполнимым и высокоинфор­мативным способом получения клеточного материала, который позволяет одномоментно взять клеточный ма­териал как из зоны язвенно-воспалительного очага, так и периферии роговицы - перифокальной и паралим­бальной зон.

Вид патентной защиты. № 14358 «Способ окра­шивания цитологического материала, полученного им­прессионным методом».