УДК: 616.995.11+593.1]: 544.723
Год издания: 2011

Сорбционный метод обнаружения яиц гельминтов и цист простейших в копроматериале

Скрипова Л.В.
Рубрики: 76.03.45
Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии
Тема НИР: «Разработать метод обнаружения возбудителей кишечных паразитарных болезней на основе адсорбции и создать диагностический набор»
Сроки выполнения НИР: январь 2009 г. — декабрь 2010 г.
Научный руководитель: д-р биол. наук Л.В. Скрипова
Источник финансирования: госбюджет

В связи с тем, что подавляющее большинство гель­минтов и простейших в половозрелой стадии у человека обитает в желудочно-кишечном тракте или связанных с ним органах (печень, желчный пузырь, поджелудочная железа), наиболее распространенными при диагности­ке являются копрологические методы исследования.

Непременным условием полноценной лаборатор­ной диагностики паразитарных болезней является вы­сокий уровень методики исполнения исследований. Он может быть достигнут при выполнении текущей нагрузки с помощью чувствительной, малозатратной по времени и экономически эффективной методики на уровне современных научных знаний и доступных для лабораторий широкой сети.

В настоящее время в мире становятся популярны методы адсорбции. Задача авторов - разработать сорб­ционный метод обнаружения возбудителей кишечных паразитарных болезней.

При разработке технологии пробоподготовки были учтены, входящие в состав копроматериала физиче­ские элементы (консистенция, рН, жиры, кислоты, фер­менты, слизь, мышечные волокона, растительная клет­чатка, эпителиальные клетки), которые способствуют сокрытию яиц гельминтов, цист простейших. С учетом многих факторов, присущих исследуемому материалу, экспериментально были подобраны химические реа­генты. Работа проводилась с использованием культуры яиц аскарид и цист лямблий.

Изучив состав копроматериала и воздействие сорби­рующей смеси на его среду, для отделения яиц гельмин­тов и цист простейших, соответствующих удельному весу основных возбудителей, рассчитано количествен­ное соотношение его к нейтральной воде (рН-7,6).

Было установлено, что коагулянты в количестве 0,2 г в отдельности флотируют до 84-86% возбудителей с плот­ностью от 1,0 до 1,14. В дальнейшем для усиления адсорб­ции, в смесь коагулянтов был введен сорбент. При смеши­вании коагулянтов и предложенного сорбента увеличилось улавливание яиц аскарид и цист лямблий до 96%.

Проведен поиск оптимальных объемов объектов исследования. За основу были взяты: искусственно об­семененные яйцами аскарид и цистами лямблий копро­материал и дистиллированная вода. Готовили суспен­зию, доводя до гомогенной массы. В дальнейшем для выделения патогенов вносили в суспензию сорбирую­щую смесь. Исследования показали, что количество используемой воды и смеси реагентов во всех трех слу­чаях, не зависимо от объема исследуемого материала адсорбировала от 88 до 94% экземпляров возбудителей.

Высокая эффективность обнаружения установле­на при условии, если в состав суспензии будет входить определенное количество копроматериала, воды и смеси реагентов. Было показано, что объем материала и пред­ложенное количество химических реагентов оказывает существенное влияние на отделение возбудителей.

В результате проведенных экспериментальных ис­следований с использованием химических реагентов и культуры возбудителей была отработана технология пробоподготовки копроматериала для отделения яиц гельминтов и цист простейших. Проведен подбор хи­мических реагентов для подготовки копроматериала к взаимодействию и механизмам задержки возбудителей группы кишечных паразитарных заболеваний.

На основе современной технологии пробоподготов­ки копроматериала к исследованию с использованием сорбентов разработан метод одновременного обнару­жения яиц трематод, нематод, цист, ооцист простейших и создан диагностический набор.

Разработанный метод позволяет получать каче­ственные результаты обследования населения с целью выявления кишечных гельминтозов и протозойных за­болеваний в короткие сроки (до 10 мин), с минималь­ными затратами на имеющемся в лабораториях обо­рудовании. Стоимость одновременного обнаружения нескольких (до 8) видов возбудителей в 12 раз ниже импортного - 0,2 доллара США.

Таким образом, экспериментально отработанная технология позволила разработать эффективный до 96% метод обнаружения яиц гельминтов и цист про­стейших в копроматериале.



в начало med.by баннеры учреждения авторы расширенный поиск
Достижения медицинской науки Беларуси.
Copyright © 1997-2024 НИО РНМБ
Вопросы и комментарии просьба отправлять Администратору сайта