Цель: рассчитать концентрацию лейкерана, позво-ляющую выявить особенности индивидуальной лекар-ственной чувствительности лейкозных клеток к нему in vitro.

Лейкеран используется в терапии лейкозов в ка-честве самостоятельного лекарственного средства на протяжении уже 55 лет, однако для него не установлена оптимальная терапевтическая доза, и в каждом случае его назначают исходя из клинической картины заболевания. Эффективность терапии оценивают после длительного курса химиотерапии, что нередко сопровождается серьезными осложнениями. В связи с этим существенным является установление лекарственной чувствительности лейкозных клеток пациента до назначения продолжительного курса лечения и затем постоянное ее мониторирование.

В исследовании использовали образцы лимфоцитов периферической крови пациентов с ХЛЛ гематологических отделений 9-й ГКБ г. Минска. Выделение лимфоцитов проводили согласно стандартной методике путем наслоения цельной крови на градиент фиколлверографина. Выделенные лимфоциты культивировали в среде RPMI-1640 (Sigma, США) с добавлением 10% фетальной телячьей сыворотки (ФТС), 2 мM L-глутамина (Sigma, США), 100 Ед/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина при 37 ^o С во влажной атмос-фере с 5% СО ₂ . Для определения чувствительности к химиопрепаратам лимфоциты культивировали с лейкераном в концентрациях 2,5; 7,5 и 15 мкг/мл, диапазон колебаний которых находился в пределах, близких к концентрациям, которые обнаруживаются в крови в процессе терапии.

Чувствительность лимфоцитов периферической крови к химическим воздействиям определяли с помощью МТТ-теста, основанного на способности живых клеток перерабатывать 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенилтетразолиум бромид в формазан.

Для каждой концентрации высчитывали среднее значение и стандартное отклонение выживаемости лейкозных клеток в группе образцов. На основании этих данных строилась сигмовидная кривая (рис. 1).

Значение LC ₅₀ (концентрация препарата, при кото-рой погибает половина популяции лейкозных клеток) находили путём интерполяции между точками кривой выживаемости (рис. 1). Для лейкерана LC ₅₀ в случае с лейкозными клетками составила 7,5 мкг/мл.

Выявленная концентрация LC₅₀ позволяет определить индивидуальные особенности лекарственной чувствительности лейкозных клеток к лейкерану. На рис. 2 представлены данные по выживаемости 88 образцов клеток пациентов с ХЛЛ, проинкубированных с лейке-раном в концентрации 7,5 мкг/мл. Видно, что выживае-мость образцов клеток с различной чувствительностью варьировала в широком диапазоне.

Таким образом, доза лейкерана, позволяющая выявить индивидуальные особенности лекарственной чувствительности in vitro, составила 7,5 мкг/мл. Использование лейкерана в скрининговом наборе в такой дозе обеспечивает широкий диапазон оценки лекарственной чувствительности лейкозных клеток у конкретных пациентов с различной лекарственной чувствительностью.