УДК: 616.132-018.74-091:616.153.915]-092.9
Год издания: 2013
Морфологические изменения эндотелиоцитов в мазках-отпечатках аорты крыс в различные сроки экспериментальной дислипидемии
Криворот С.Г., Владимирская Т.Э., Швед И.А.
Рубрики: 76.35.33
Белорусская медицинская академия последипломного образования
Тема НИР: «Разработать комплекс морфологических и биохимических критериев оценки дисфункции эндотелиоцитов аорты и коронарных артерий на ранних стадиях атерогенных нарушений (экспериментальное исследование)».
Сроки выполнения НИР: 2011–2013 гг.
Научный руководитель: д-р мед. наук, проф. И.А. Швед, канд. биол. наук Т.Э. Владимирская.
Источник финансирования: госбюджет.
Эндотелий играет важную роль во многих физиологических и патофизиологических процессах сосудистой стенки. Морфологические признаки повреждения эндотелия все еще недостаточно раскрыты в литературе.
Цель - изучение гетерогенности эндотелия стенки аорты в условияхэкспериментальной дислипидемии.
Для анализа гетерогенности эндотелия в различные сроки атерогенной диеты (15, 30, 60, 90 и 180 сут) применялись цитологический и морфометрический методы исследования ядер эндотелиальных клеток (ЭК).Исследуемый сосуд экспериментальных животных (крыс) тщательно промывали в солевом фосфатном буфере и получали мазки-отпечатки с интимальной поверхности сосуда, препараты окрашивали по Паппенгейму, изучение их и изготовление микрофотографий проводили с помощью микроскопа Leica DMLS.
При цитологическом исследовании непораженных участков аорт крыс в большинстве случаев в клетках эндотелия выявлялись типичные ядра, имеющие округлую или овальную форму. На 15-е сут атерогенной диеты отмечено наличие ЭК в виде пластов и единичных клеток. Форма и размеры ядер варьируют: ядра округлой, овальной, изогнутой формы, гиперхромные. Встречаются ядра с явлениями митоза и «голоядерные» ЭК. На 30-е сут эксперимента в отдельно лежащих ЭКи их группах появляются одноядерные клетки с крупными, перекрученными ядрами, с перетяжками и без. Хроматин равномерный компактный по всей площади, отдельные ядра содержали конденсированный хроматин. Ядрышки не просматривались, цитоплазма умеренная, местами скудная, контуры размыты, границы ее нечеткие, неровные. На 60-е сут эксперимента появлялись двуядерные ЭК, с компактным хроматином, отмечались борозды через все ядро, ядра бобовидной формы. Хроматин в большинстве клеток располагался равномерно, в некоторых ядрах - глыбчатый. На сроке 90 сут в отдельных местах мазкаотпечаткапоявлялисьЭКс дегенеративными изменениями ядер. Цитоплазма при этом густая, интенсивно окрашена. Встречались единичныеЭК с признаками апоптоза (конденсация хроматина, округление ядра, фрагментация на отдельные апоптотические тельца). На 180 сут хроматин в ядрах, как правило, глыбчатый, наблюдались клетки с конденсированными ядром и цитоплазмой, которая в большинстве клеток четко очерчена, отмечалось появление вакуолей в цитоплазме клеток как отдельно лежащих, так и в пластах.
Морфометрическое исследование мазков-отпечатков аорт показало, что площадь ядер была достоверно выше (р<0,05) по сравнению с контролем на 15, 30, 60, 90 сут эксперимента. На 180 сут отмечалось резкое уменьшение площади ядра в ЭК с приближением значений к контрольным (р>0,05). Отмечена умеренная обратная связь между увеличением срока эксперимента и сокращением площади ядра (r=-0,38, р<0,05).
Установлено, что атерогенная диета в течение 15, 30, 60 и 90 сут сопровождается достоверным увеличением площади ядра ЭК у крыс по сравнению с контролем с максимальной величиной на 90 сут эксперимента, что может свидетельствовать о включении компенсаторных механизмов в ответ на утрату ЭК в результате их гибели по типу апоптоза.
Область применения: кардиология, патофизиология, клиническая лабораторная диагностика.