УДК: 578.76:613.31
Год издания: 2013

Создание комплексного набора для экспресс-детекции вирусных агентов в питьевой воде

Амвросьева Т.В.Поклонская Н.В.Дедюля К.Л.Казинец О.Н.
Рубрики: 34.15.2934.25.3976.03.41
Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии
Тема НИР: «Разработать и внедрить препарат для экспресс-индикации вирусных патогенов в объектах водоснабжения».
Сроки выполнения НИР: январь 2011 г. — декабрь 2013 г.
Научный руководитель: д-р мед. наук, проф. Т.В. Амвросьева.
Источник финансирования: госбюджет; внебюджетные источники.

Контроль качества питьевой воды по вирусологи­ческим показателям имеет приоритетное значение в общей системе эпиднадзора за вирусными инфекция­ми. Поэтому создание и внедрение в практику лабо­раторных служб стандартных лекарственных средств, основанных на использовании современных техноло­гий изоляции вирусных агентов из водной среды и их специфической индикации, является актуальным на­правлением исследований санитарной вирусологии.

Цель - разработка комплексного санитарно-вирусологического лекарственного средства для экспресс-индикации вирусного загрязнения объектов питьевого водоснабжения, включающего комплект реа­гентов для улавливания и последующей ПЦР-детекции вирусов-контаминантов воды.

В ходе создания технологии улавливания вирусов из водной среды разработана техническая документа­ция и сконструировано специальное фильтрационное устройство (насадка на водопроводный кран) для от­бора проб, позволяющее осуществлять фильтрацию не менее 1000 л проточной водопроводной воды. В экспе­риментальных условиях подобраны следующие сор­бирующие материалы отечественного производства и оптимальные параметры их использования: тип сор­бирующего материала - ФИБАН А5 или ФИБАН А6, масса - 15 г, объем пропускаемой питьевой воды - 1000 л, скорость ее протекания - 40-45 л/ч.

Разработана технология выявления изолирован­ных из питьевой воды норо- и энтеровирусов методом ПЦР в режиме реального времени с гибридизационно-флюоресцентной детекцией. Для этих целей подобра­ны вирусспецифические праймеры и гибридизацион­ные зонды, отработаны оптимальные условия поста­новки реакции, выбран состав реакционной смеси и температурный режим амплификации.

На основе выполненных разработок создана экспе­риментальная партия «Набора для отбора проб и ин­дикации кишечных вирусов в питьевой воде методом ПЦР» (далее Набор), включающего 2 комплекта реа­гентов: 1) для отбора и концентрирования проб питье­вой воды (комплект № 1) и 2) для ПЦР-детекции улов­ленных из питьевой воды норо- и энтеровирусов (ком­плект № 2). Лабораторные испытания разработанного Набора в условиях искусственной вирусной контамина­ции питьевой показали его достаточно высокую эффек­тивность. Так, специфичность улавливания и выявле­ния энтеровирусов составила 100% (50 положительных проб из 50 контаминированных), норовирусов - 98% (49 положительных проб из 50 контаминированных), что соответствовало заявленным показателям контро­ля качества Набора при пороге чувствительности ПЦР-детекции 5х103 ГЭ/мл. В ходе полевых испытаний На­бора при санитарно-вирусологическом исследовании 85 проб воды, отобранных из городского водопровода с помощью комплекта № 1 и далее исследованных мето­дом ПЦР с использованием комплекта № 2, в 2 пробах были обнаружены энтеровирусы. Наличие энтеровирус­ных агентов в данных пробах и отсутствие энтеровирус­ного загрязнения в остальных было подтверждено в па­раллельных исследованиях при использовании коммерче­ской ПЦР-тест-системы.

Полученные результаты указывают на возможность широкого практического использования разработанного Набора для осуществления санитарно-вирусологического контроля качества питьевой воды на предмет выявления ее контаминации энтеро- и норовирусами.


Область применения: санитарная вирусология, эпидемиология.
Рекомендации по использованию: санитарно-вирусологические исследования воды в системе централизованного хозяйственно-питьевого водоснабжения.
Предложения по сотрудничеству: консультативная помощь по созданию и использованию санитарно-вирусологических и диагностических лекарственных средств для индикации кишечных вирусов.


в начало med.by баннеры учреждения авторы расширенный поиск
Достижения медицинской науки Беларуси.
Copyright © 1997-2019 НИО РНМБ
Вопросы и комментарии просьба отправлять Администратору сайта