УДК: 616.98:578.823.9]-097-07
Год издания: 2013

Тест-система для определения антител классов А, G, М к ротавирусам методом иммуноферментного анализа

Гудков В.Г.Виринская А.С.
Рубрики: 76.03.4176.35.33
Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии
Тема НИР: «Разработать диагностические препараты, провести молекулярно-эпидемиологический и серологический мониторинг в отношении ротавирусной инфекции».
Сроки выполнения НИР: январь 2011 г. — декабрь 2013 г.
Научный руководитель: канд. мед. наук, доц. В.Г. Гудков.
Источник финансирования: госбюджет.

Известно, что иммунитет является важнейшим ме­ханизмом защиты от инфекции, поэтому изучение осо­бенностей и контроль состояния коллективного имму­нитета при ротавирусной инфекции (РВИ) является неотъемлемой частью системы эпидемиологического надзора за этой инфекцией.

Максимальное значение титра иммуноглобулинов класса IgM можно обнаружить к 10-14-му дню от на­чала заболевания, в течение последующих 6-10-ти недель титр постепенно снижается. В эти же сроки после инфицирования выявляются и секреторные иммуноглобулины класса IgА. Антитела класса G по­являются в конце первой недели заболевания, дости­гают своего максимума через 3-4 недели и сохраня­ются длительное время. При повторном инфициро­вании в крови практически одновременно появляют­ся иммуноглобулины всех трех классов, обусловли­вая развитие относительно легкой формы заболева­ния.

Серологический мониторинг традиционно направ­лен на изучение коллективного иммунитета в отно­шении возбудителей инфекции. Данные об иммуно­структуре населения к возбудителю позволяют судить о реальной распространенности инфекции, выявлять незащищенные (неиммунные) контингенты, прогнози­ровать эпидемические подъемы и спады заболеваемо­сти, определять эффективность применяемых вакцин и результативность вакцинации, однако этому препят­ствует отсутствие соответствующих коммерческих ле­карственных средств в отношении РВИ.

Цель - разработка тест-системы иммунофермент­ной комбинированной для определения антител клас­сов А, G, М к ротавирусам.

Тест- система предназначена для определения анти­тел классов А, G, М к ротавирусам в сыворотках кро­ви и слюне. Она представляет собой набор, состоящий из 16 компонентов, планшета иммунобиологическо­го, липкой ленты и инструкции по применению. Тест-система рассчитана на проведение 288 исследований: по 96 исследований на каждый из 3 классов антител. Срок годности тест-системы - 1 год с даты изготовления.

Принцип действия тест-системы основан на т. н. методе захвата антител (capture assay), являющемся наи­более эффективным методом детекции специфических иммуноглобулинов, и состоит в следующем. Лунки планшета для иммунологических реакций сенсибили­зируются гетерологичными иммуноглобулинами про­тив тяжелых цепей одного из классов иммуноглобули­нов человека (IgA, IgG, IgМ). Затем вносится исследу­емая сыворотка или слюна. Содержащиеся в сыворот­ке или слюне иммуноглобулины классов IgA, IgG, IgМ связываются с сорбированными антителами к ним по­сле чего добавляется культуральный ротавирусный ан­тиген. При наличии в исследуемых образцах противо­ротавирусных антител соответствующего класса в лун­ках планшета образуется иммунный комплекс из всех внесенных иммунобиологических компонентов. По­следующее внесение противоротавирусного иммуно­пероксидазного конъюгата приводит к специфическо­му взаимодействию с иммунным комплексом. Это про­является в окрашивании субстрат-индикаторного рас­твора, добавленного в лунки. Напротив, в случае от­сутствия антител определяемого класса к ротавирусам в исследуемой пробе иммунный комплекс в лунке не образуется, что проявляется отсутствием окрашивания субстрат-индикаторного раствора. Степень окрашива­ния определяется спектрофотометрически при длине волны измерения 450 нм, фоновой волны - 620 нм.

Разработанная тест-система позволит контроли­ровать структуру и напряженность коллективного иммунитет к ротавирусам, оценивать эффективность вакцинации, уточнять этиологию ОКИ. Коммерче­ских аналогов этого лекарственного средства в насто­ящее время нет. Государственную регистрацию тест-системы планируется завершить в 2013 г.

Вид патентной защиты: патент РФ № 1687613 от 19.12.2009; патентовладелец - РНПЦ эпидемиологии и микробиологии.


Область применения: эпидемиология ротавирусной инфекции.
Рекомендации по использованию: серологический мониторинг за ротавирусной инфекцией.
Предложения по сотрудничеству: изготовление и поставка тест-системы по заказу любыми партиями; реализация по конкурентным ценам, совместные исследования с использованием тест-системы.


в начало med.by баннеры учреждения авторы расширенный поиск
Достижения медицинской науки Беларуси.
Copyright © 1997-2019 НИО РНМБ
Вопросы и комментарии просьба отправлять Администратору сайта