УДК: 616.993:576.8]-074/.079:577.21
Год издания: 2013
Критерии клинико-лабораторной диагностики клещевых микст-инфекций. Разработка тест-системы для дифференциации клещевых инфекций методом ПЦР
Дракина С.А., Корбут Л.В., Счесленок Е.П., Семижон П.А., Краско А.Г., Девятникова В.А., Анисько Л.А., Щерба В.В., Рогачева Т.А.
Рубрики: 76.03.41, 76.13.25
Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии
Тема НИР: «Разработать критерии клинико-лабораторной диагностики и схему терапии клещевых микст-инфекций. Создать тест-систему для дифференциации трансмиссивных бактериальных инфекций методом ПЦР».
Сроки выполнения НИР: январь 2011 г. — декабрь 2013 г.
Научный руководитель: канд. мед. наук, доц. А.Г. Красько.
Источник финансирования: госбюджет.
В последние десятилетия внимание медицинской общественности привлечено к проблеме микст-инфекций, передающихся иксодовыми клещами. Показано, что один и тот же клещ может быть переносчиком до 7 патогенных для человека агентов вирусо-бактериальной природы, причем множественность заражения клещей является правилом, а не исключением. При присасывании мультизараженного клеща у человека может развиться как моноинфекция, так и несколько клещевых инфекций в различных сочетаниях и разнообразных клинических формах.
Цель - разработка критериев клинико-лабораторной диагностики клещевых микст-инфекций и создание диагностической тест-системы.
Анализ результатов обследования пациентов на наличие клещевых инфекций показал, что в период 2009-2012 гг. среди госпитализированных в УЗ «Минская городская клиническая инфекционная больница» пациентов, которые отмечали присасывание клещей, преобладает Лайм-боррелиоз (ЛБ) -185 случаев из 237. Среди 185 пациентов с диагнозом ЛБ в 1 стадии заболевания поступило 94 пациента (50,8%): у 71 из них диагностирована эритемная форма заболевания, у 23 - безэритемная, которая развилась в течение месяца со дня присасывания клеща. Во 2 стадии заболевания поступил 51 пациент (27,6%). Ведущими синдромами в стадии ранней диссеминации явились поражение опорно-двигательного аппарата и нервной системы. 33 пациента отмечали боли в крупных и мелких суставах (у 12 из них в анамнезе была мигрирующая эритема, которая прошла без лечения). У 18 пациентов диагностировано поражение нервной системы в виде менингита, синдрома Баннварта, полиневропатии. Хроническая, 3 стадия, ЛБ диагностирована у 37 пациентов (20%). Преимущественное поражение опорно-двигательного аппарата наблюдалось у 13 пациентов и характеризовалось длительным течением. Более тяжело протекала стадия поздней диссеминации с поражением нервной системы (23 пациента). У одного пациента отмечено хроническое поражение кожи в виде очага склеродермии. В 3 случаях установлен пост-лайм синдром. Диагноз ЛБ подтвержден серологическими исследованиями и методом ПЦР у всех пациентов.
Клещевой энцефалит (КЭ) диагностирован у 51 пациента и протекал в виде серозного менингита в 65% случаев. Во всех случаях наблюдалось полное выздоровление. У 19 пациентов с диагнозом КЭ в пробах сыворотки крови обнаружены IgM и/или IgG к ЛБ. Клиническая картина при микст-инфекции протекала с более выраженной лихорадкой и головной болью, чаще и более выраженные наблюдались поражения со стороны ЦНС. Однако только в 3 случаях, согласно эпидемиологическому анамнезу, тяжести клинической картины и выявлению IgM к ЛБ, установлен диагноз микст-инфекции (КЭ + ЛБ).
Впервые в республике на основании эпиданамнеза, течения заболевания и данных лабораторного обследования (обнаружение ДНК анаплазмы в сыворотке крови) поставлен диагноз гранулоцитарного анаплазмоза человека (ГАЧ) у одного пациента. У 3 пациентов клещевая инфекция протекала в виде микст-инфекции (ЛБ+ГАЧ). Клиническая картина включала признаки обеих инфекций и была подтверждена выявлением IgM.
Таким образом, результаты обследования пациентов с клещевыми инфекциями показывают, что на территории РБ клещевые инфекции протекают как моноинфекции (КЭ, ЛБ и ГАЧ), так и в виде микст-инфекций: КЭ+ЛБ, ЛБ+ГАЧ.
На основании полученных результатов разработаны критерии диагностики (таблица), рекомендуемые для внедрения в амбулаторную службу и инфекционные стационары республики.
На основе специфических пар праймеров к диагностически значимым участкам геномов возбудителей КИ (B. burdorferi sl., A. phagocytophillum, E. muris, TBEV) и гибридизационных проб, меченных флюорофорами, позволяющими оценивать наличие специфической амплификации в пробах по уровню флюоресценции, разработана диагностическая тест-система для выявления возбудителей КИ методом ПЦР в режиме «реального времени» в клиническом и полевом материале.
Область применения: клинико-лабораторная диагностика вирусных и бактериальных клещевых инфекций.
Рекомендации по использованию: тест-система рекомендуются для внедрения в лабораторную службу Республики Беларусь.
Предложения по сотрудничеству: апробация диагностической тест-системы для проверки ее эффективности в практике здравоохранения совместно с областными ЦГЭ и клиническими инфекционными больницами.