Цель - повышение точности и информативности оценки состояния врожденной резистентности орга­низма путем определения уровня баланса бактерицид­ного потенциала фагоцитов (ББПФ), учитывающего соотношения параметров как вне-, так и внутриклеточ­ного киллинга нейтрофильных гранулоцитов, что дает дополнительные преимущества в выявлении скрытых дефектов при реализации нейтрофилами своей функ­циональной активности.

Оценку внеклеточного киллинга проводили путем определения нетоз- (NET)-образующей способности нейтрофилов после инкубации клеток в среде (спонтан­ный уровень, NETсп) и в присутствии индуктора (сти­мулированный уровень, NETст). Далее рассчитыва­ли функциональный резерв NET-образующей активно­сти нейтрофилов (ФР_NET) по формуле: ФР_NET = (NETст - NETсп)/NETст. Внутриклеточный киллинг нейтро­филов оценивали путем определения кислород (АФК)- и нитроксидпродуцирующей (NO) активности в спон­танном (АФКсп, NOсп) и стимулированном (АФКст, NOст) вариантах. Затем производили расчет функцио­нального резерва АФК-продуцирующей (ФР_АФК) и NO-продуцирующей активности (ФР_NO) нейтрофилов по формулам: ФР_АФК = (АФКст - АФКсп)/АФКст и ФР_NO = NОст/NОсп соответственно. Далее рассчитывали баланс бактерицидного потенциала фагоцитов (ББПФ) как от­ношение параметров внеклеточного киллинга к внутри­клеточному по формуле: ББПФ = ФР_NET/(ФР_АФК + ФР_NO). По уровню ББПФ судили о нарушении состояния врож­денного иммунитета: при значении ББПФ >0,24 конста­тировали дисбаланс бактерицидного потенциала лейко­цитов, свидетельствующий о нарушении врожденной резистентности организма, а при значении ББПФ≤0,24 - отсутствие изменений. Для определения пороговых значений ББПФ был проведен логистический регресси­онный анализ с построением ROC-кривых с примене­нием пакета прикладной программы SPSS for Windows, версия 17.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Установлено, что оптимальным пороговым значением для ББПФ яв­ляется 0,24 (чувствительность - 91,6% и специфичность - 80%). Также производили расчет показателей диагно­стической надежности предложенного метода (табл.),

где Т - результаты исследования - положительные (+) и отрицательные (-), ИП и ИО - истинно положи­тельные и истинно отрицательные результаты, ЛП и ЛО - ложно положительные и ложно отрицательные результаты, ПЦ(+) и ПЦ(-) - предсказательная цен­ность положительного и отрицательного результатов теста. Показатели диагностической надежности пред­ложенного метода составили: ДЧ=91,6%, ДС=80%, ПЦ(+)= 88%, ПЦ(-)= 83%.

Преимущество предлагаемого метода заключается в возможности оценки отклонений параметров врож­денной резистентности организма по уровню баланса бактерицидного потенциала фагоцитов (ББПФ) в суб­клинический период заболевания, когда минимальные изменения функционального статуса нейтрофилов мо­гут недооцениваться врачом-клиницистом. Обеспечи­вает повышение информативности исследования, по­зволяя в краткие сроки разработать индивидуальную тактику лечения конкретного пациента в зависимости от характера нарушений, тем самым способствуя уско­рению его выздоровления. Кроме того, метод может использоваться для уточнения патогенетических меха­низмов развития гнойно-воспалительных заболеваний и позволяет получать дополнительные данные о состо­янии неспецифической иммунологической резистент­ности у пациентов.

Вид патентной защиты: уведомление о положи­тельном результате предварительной экспертизы заяв­ки на выдачу патента на изобретение «Способ оценки состояния врожденной резистентности организма» от 06.05.2014 № а20140136.