Цель- разработка и применение эквивалента кожи на основе совместного культивирования кератиноцитов, фибробластов, миелоидных (моноцитарных) лимфоидных клеток и индуцированных из моноцитов периферической крови дендритных клеток для исследования межклеточных взаимодействий и роли в патогенезе заболеваний кожи.

Основные типы клеток кожи получали из биопсийных материалов общепринятыми методами. После нескольких пассажей фибробласты заключали в фибриновый гель (на основе наборов «Фибриностат»), поверхность которого засевали кератиноцитами. Незрелые дендритные клетки получали из моноцитов периферической крови и вместе с лимфоцитами добавляли в культуральную систему. После сокультивирования в течение 7 дней оценивали метаболическую активность клеток и продукцию цитокинов и факторов роста с помощью количественной ПЦР.

Рисунок 1 - Схема получения 3D модели эквивалента кожи человека

Разработана 3D-модель эквивалента кожи человека на основе фибринового геля. Полученная модель предполагает совместное культивирование клеток кожи - кератиноцитов и фибробластов, лимфоидных клеток - лимфоцитов периферической крови и дендритных клеток, индуцированных из моноцитов периферической крови. Определены оптимальные концентрации и соотношение компонентов фибринового геля (фибриногена, тромбина, CaCl₂), а также произведена оценка его стабильности. Изучена жизнеспособность и экспрессия генов фактора роста кератиноцитов (KGF), фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), фактора некроза опухолей (TNF), IL 6, β-дефензинов (BDF), интерлейкинов (IL 17, IL 12), интерферона γ (IFN), цитокератина 16 (CK 16) культивируемыми клетками.