Цель- разработка новой методологии видовой идентификации микобактерий с целью совершенствования дифференциальной диагностики туберкулеза и микобактериозов.

При бактериологической диагностике туберкулеза раннее выявление и идентификация микобактерий туберкулезного комплекса (МБТ) и нетуберкулезных микобактерий (НТМ) позволяет дифференцировать туберкулез и микобактериоз, а также заболевания, вызываемые НТМ.

Микобактериозы, вызываемые НТМ, характеризуются сходством с туберкулезом по клинико-рентгенологическим проявлениям, но требуют отличного от туберкулеза лечения из-за высокой природной резистентности НТМ к противотуберкулезным лекарственным средствам с учетом видовой принадлежности возбудителя.

Ретроспективный анализ частоты выделения НТМ в республике за период 1990-2015 гг. выявил значительное увеличение количества и видового разнообразия выделения культур НТМ. Применяемый большой спектр разнообразных культуральных и биохимических методов, их несовершенство, большая вариабельность результатов затрудняют идентификацию микобактерий и ведут к значительному недовыявлению нетуберкулезных микобактерий и микобактериозов, а зачастую и к гипердиагностике туберкулеза.

Нами предложена новая методология выделения и идентификации микобактерий, которая базируется на сочетании оптимального комплекса культуральных исследований с использованием автоматизированной системы детекции микобактерий иммунохроматографического теста на обнаружение специфического белка МРТ64, комплекса культуральных и биохимических методов, молекулярно-генетических методов (Xpert MTB/Rif и гибридизация с ДНК-зондами, LPA).

На основе новой методологии разработан алгоритм видовой идентификации НТМ с проведением предварительной идентификации выделенной чистой культуры микобактерий, включающей оценку скорости роста микобактерий на плотных и в жидкой питательной средах, характер роста МБТ, изучение морфологии, кислотоустойчивости бактерий, наличие корд-фактора, иммунохроматографического обнаружения белка МРТ64. Основными биохимическими тестами, используемыми для идентификации микобактерий, являются ниациновый тест, нитратредуктазный тест и тест с паранитробензойной кислотой (ПНБ-тест). Совершенствование идентификации микобактерий позволило исключить широко применяемые ранее тесты: каталазный тест, тесты температурного оптимума и тесты фотореактивности.

Окончательная видовая идентификация базируется на применении молекулярно-генетического метода гибридизации с ДНК-зондами с использованием сертифицированных тест-систем.

Внедрение в практику новой методологии идентификации микобактерий в республике позволило в течение последних 5 лет повысить точность видовой идентификации и увеличить частоту выделения НТМ с 0,3 до 2,2% от общего числа выделенных культур микобактерий, сократить сроки и повысить точность диагностики туберкулеза и микобактериозов легких.