УДК: 616-002.5:579.873.21:615.281.873.21]-07
Год издания: 2017

Диагностика лекарственно-устойчивого туберкулеза на основе использования молекулярно-генетических методов и ускоренного бактериологического исследования

Гуревич Г.Л.Скрягина Е.М.Суркова Л.К.Яцкевич Н.В.Николенко Е.Н.Залуцкая О.М.
Рубрики: 76.03.4376.29.53
Республиканский научно-практический центр пульмонологии и фтизиатрии
Тема НИР: «Разработать и внедрить комплексный метод диагностики мультирезистентного туберкулеза с использованием ускоренных бактериологических и молекулярно-генетических исследований».
Сроки выполнения НИР: I кв. 2016 г. — IV кв. 2020 г.
Научный руководитель: д-р мед. наук, проф. Л.К. Суркова
Источник финансирования: госбюджет.

Цель работы - разработка комплексного метода ранней диагностики туберкулеза с одновременным определением лекарственной чувствительности микобактерий туберкулеза (МБТ) к противотуберкулезным лекарственным средствам (ПТЛС) первого и второго ряда и оптимизация алгоритма лабораторной диагностики лекарственно-устойчивого (рифампицин-устойчивого) туберкулеза.

Ранняя диагностика туберкулеза и обеспечение универсального доступа к тестированию лекарственной чувствительности (ТЛЧ) МБТ является одним из основных принципов стратегии борьбы с туберкулезом в современных условиях.

Сложность лабораторной диагностики туберкулеза в республике связана с поздним выявлением и недовыявлением множественно/широко лекарственно-устойчивого туберкулеза (МЛУ/ШЛУ-ТБ), многообразием и дублированием исследований, расхождением результатов, полученных разными методами, и проблемами транспортной логистики образцов клинического материала в регионах.

Новая методология лабораторной диагностики основывается на принципе обеспечения ранней диагностики не только МЛУ-ТБ, но и пре- и ШЛУ-ТБ в сроки до 7 дней не менее чем у 95% пациентов. На основе новой методологии разработан комплексный метод диагностики мультирезистентного (рифампицин-устойчивого) туберкулеза.

Комплексный метод включает микроскопическое исследование по Цилю-Нильсену, комбинацию двух молекулярно-генетических методов в режиме реального времени (Xpert MTB/Rif) и гибридизацию со специфическими ДНК-зондами на линейных стрипах (LPA MTB DR plus/sl) в сочетании с посевом и ТЛЧ в жидкой питательной среде с использованием автоматизированной бактериологической системы Bactec MGIT 960.

Все тесты выполняются на одном клиническом образце. Для осуществления комплексного метода проводятся исследования 2-х образцов клинического материала, последовательно взятых с интервалом 8-24 ч. Один из образцов должен быть собран в утренние часы. Первый образец клинического материала исследуется одновременно комплексом методов: микроскопия мазка по Цилю-Нильсену, тесты Xpert MTB/Rif и LPA MTB DR plus/sl, посев и ТЛЧ в жидкой питательной среде в автоматизированной бактериологической системе для ускоренной диагностики туберкулеза. Второй образец, полученный от пациента в интервале 8-24 ч, исследуется комплексом методов: микроскопия мазка по Цилю-Нильсену и ТЛЧ в жидкой и плотной питательной среде.

Исследование первого образца проводится поэтапно. Первый этап включает микроскопию мазка с целью определения наличия либо отсутствия кислотоупорных бактерий (КУБ) в мазке и тест Xpert MTB/Rif с выявлением ДНК МБТ и наличия или отсутствия устойчивости МБТ к рифампицину.

Второй этап включает молекулярно-генетическое исследование того же образца тестом LPA MTB DR plus или sl в зависимости от наличия КУБ в мазках и устойчивости/чувствительности МБТ в тесте Xpert MTB/Rif.

При наличии КУБ+ в мазке образец исследуется тестом LPA MTB DR plus или LPA MTB DR sl версия 1 (далее MTB DR plus/sl). MTB DR plus и MTB DR sl 2-й версии можно использовать для образцов клинического материала вне зависимости от результатов микроскопии.

На данном этапе определяется ДНК микобактерий комплекса M. tuberculosis, а также наличие либо отсутствие мутаций в генах, ассоциированных с устойчивостью/чувствительностью к изониазиду при выявлении чувствительности к рифампицину в тесте Xpert MTB/Rif и инъекционным ПТЛС и фторхинолонам при определении устойчивости к рифампицину в тесте Xpert MTB/Rif.

Третий этап включает посев того же образца в жидкую питательную среду на автоматизированной системе Bactec MGIT 960 и ТЛЧ выделенной культуры к ПТЛС первого или одновременно первого и второго ряда.

Внедрение предлагаемого комплексного метода в алгоритм диагностики лекарственно-устойчивого (рифампицин-устойчивого) туберкулеза будет способствовать улучшению ранней диагностики и назначению адекватного лечения в кратчайшие сроки к своевременному разделению пациентов в зависимости от их эпидемиологической опасности. Это будет способствовать повышению эффективности лечения лекарственно-устойчивого туберкулеза и предотвращению тем самым его дальнейшей трансмиссии.


Область применения: фтизиатрия, медицинская микробиология.
Рекомендации по использованию: результаты исследования могут быть внедрены в противотуберкулезных учреждениях здравоохранения республики.
Предложения по сотрудничеству: консультативная помощь при внедрении, совместные исследования по указанной тематике.


в начало med.by баннеры учреждения авторы расширенный поиск
Достижения медицинской науки Беларуси.
Copyright © 1997-2022 НИО РНМБ
Вопросы и комментарии просьба отправлять Администратору сайта