Цель - разработать и внедрить в практику здравоохранения Гомельской области систему микробиологического тестирования комбинаций антибактериальных препаратов, эффективных в отношении экстремально-антибиотикорезистентных грамотрицательных бактерий.

В многочисленных исследованиях установлено, что для подбора эффективных комбинаций антибиотиков целесообразно микробиологическое тестирование бактериальных изолятов, выделенных от конкретного пациента. В Беларуси и странах СНГ тестирование эффективности комбинаций антибиотиков не проводится, что связано с отсутствием доступных методик и подготовленных кадров. С исследовательской целью для определения антимикробного эффекта комбинаций антибиотиков в мире используются различные методы, большинство из которых является дорогостоящими и трудозатратными, не применимыми для рутинного использования в клинической практике.

На основе разработанного в 2000 г. в Канаде метода MCBT (Multiple combination bactericidal testing, тестирование бактерицидности различных комбинаций) с учетом современных данных о фармакокинетике и фармакодинамике антибиотиков создан и адаптирован микробиологический метод, позволяющий подбирать эффективные комбинации из двух или трех антибиотиков, обладающие бактерицидной активностью в отношении экстремально-антибиотикорезистентных бактерий. В отличие от существующих методов тестирование проводится для фиксированных концентраций антибиотиков, аналогичных ФК/ФД-концентрациям, создаваемым в организме при назначении стандартных терапевтических доз. Проводится одновременное тестирование для 10-20 различных комбинаций, возможно тестирование комбинаций, состоящих как из двух, так и из трех антибиотиков. Метод позволяет дифференцировать бактерицидный и бактериостатический эффект комбинаций антибиотиков на микроорганизм, что невозможно в большинстве описанных в научной литературе исследований.

Перечень комбинаций антибиотиков, рекомендуемых для тестирования, создан с учетом их доступности на фармацевтическом рынке республики. Полный цикл исследования с момента получения чистой культуры до оформления микробиологического заключения занимает 72-96 ч. Плановая себестоимость выполнения одного исследования (при условии выполнения одновременного тестирования для 16 и более бактериальных изолятов) составляет 12,63 руб. (6,53 доллара США), что в 10 раз и более ниже, чем для других описанных методов. Метод адаптирован для внедрения в рутинную практику микробиологических лабораторий республики.

С использованием разработанного метода определена чувствительность к 11 различным комбинациям антибиотиков для 130 клинических изолятов экстремально-антибиотикорезистентных и панрезистентных грамотрицательных бактерий (из них Klebsiella pneumoniae - 11 изолятов, Pseudomonas aeruginosa - 82, Acinetobacter baumannii - 37), выделенных от госпитализированных пациентов в 20 организациях здравоохранения г. Гомеля и Гомельской области.

Для K.pneumoniae отмечена бактерицидная активность всех комбинаций с включением колистина (меропенем - колистин, амикацин - колистин, левофлоксацин - колистин, тигециклин - колистин, фосфомицин - колистин) в отношении большинства исследуемых штаммов, что может быть связано с невысокими значениями минимально предельной концентрации (МПК) колистина и отсутствием устойчивости к нему у всех тестируемых изолятов. Комбинации меропенема с фосфомицином, левофлоксацином, амикацином, а также комбинации амикацин-тигециклин и амикацин-левофлоксацин не обладали бактерицидной активностью.

Для P.aeruginosa наиболее активными были комбинации меропенем-колистин и имипенем-колистин (бактерицидная активность в отношении 82,9 и 89,0% изолятов соответственно). Для 8 экстремально-антибиотикорезистентных и панрезистентных изолятов P.aeruginosa бактерицидная активность обнаружена только для одной из 11 протестированных комбинаций антибиотиков (меропенем-колистин или имипенем-колистин). В этой связи проводилось дополнительное тестирование к тройным комбинациям антибиотиков. Комбинация рифампицин-колистин-меропенем оказывала бактерицидный эффект в отношении всех включенных в дополнительное исследование штаммов. Комбинации ванкомицин-колистин-меропенем, ванкомицин-колистин-имипенем, рифампицин-колистин-амикацин были бактерицидными в отношении 7 из 8 исследуемых штаммов.

В отношении A.baumannii отмечена бактерицидная активность (94-100% чувствительных штаммов) для всех комбинаций с включением колистина (меропенем-колистин, амикацин-колистин, левофлоксацин-колистин, сульбактам-колистин, тигециклин-колистин). Бактерицидная активность других комбинаций не превышала 6% для всех комбинаций с включением меропенема (меропенем-амикацин, меропенем-левофлоксацин) и 30% для комбинаций с включением сульбактама (меропенем-сульбактам, тигециклин-сульбактам, амикацин-сульбактам).