Среди многочисленных врожденных нарушений обмена веществ, которых к настоящему времени насчитывается около 1000 нозологий, существует уникальная группа заболеваний, описанных относительно недавно (70-80-е г. XX в.) и пока недостаточно изученных. Биохимические и молекулярно-генетические механизмы этих заболеваний лишь недавно были открыты. Эта группа заболеваний - наследственные дефекты посттрансляционной модификации белков, содержащих углеводные компоненты (наследственные дефекты гликозилирования, СDG-синдромы). Наследственные дефекты гликозилирования - редкие генетически детерминированные нарушения метаболизма, развитие которых обусловлено дефицитом активности ферментов, осуществляющих гликозилирование, т.е. модификацию белков и других макромолекул путем присоединения и изменения углеводных цепей. Сегодня CDG-синдромы - самая «быстрорастущая» группа врожденных ошибок метаболизма: в 2013 г. описания новых наследственных нарушений гликозилирования публиковались едва ли не каждый месяц. В настоящее время группа CDG-синдромов включает более 80 заболеваний, которые диагностированы более чем у 1000 пациентов во всем мире.

Болезнь Жакена (PMM2-CDG, CDG-Ia, наследственный дефицит фосфоманномутазы 2) - наиболее распространенный и хорошо изученный CDG-синдром. Заболевание относится к I типу изолированных нарушений N-гликозилирования и возникает в результате повреждения гена PMM2, который кодирует фермент фосфоманномутазу 2. Распространенность PMM2-CDG составляет 1:20 000, частота носительства заболевания - 1:60-1:79. Тип наследования - аутосомно-рецессивный. Различают три типа PMM2-CDG:

1. Инфантильный мультисистемный тип, который включает две формы: нефатальную чисто неврологическую и неврологическую мультивисцеральную.

2. Позднеинфантильный, детский тип.

3. Взрослый тип.

В клинической картине PMM2-CDG доминируют признаки поражения нервной системы, которые сочетаются со специфическими дисморфиями, симптомами поражения глаз, скелета и внутренних органов: печени, сердца, эндокринных желез, почек. Спектр неврологических проявлений PMM2-CDG включает умственную отсталость (от тяжелой до очень легкой), мозжечковый синдром вследствие гипоплазии/прогрессирующей атрофии мозжечка, мышечную гипотонию (преимущественно в неонатальном периоде), прогрессирующую периферическую полинейропатию, судорожный синдром, инсультоподобные эпизоды.

Всех пациентов с мозжечковой атаксией, непрогрессирующей умственной отсталостью и сопутствующей мультивисцеральной патологией необходимо обследовать на болезнь Жакена.

Цель - разработать метод ДНК-диагностики болезни Жакена.

Прямое секвенирование 2-го и 5-го экзонов гена PMM2 было выполнено пациентке с известным диагнозом CDG-Ia и 4-м лицам с подозрением болезни Жакена.

Методом секвенирования по Сэнгеру было подтверждено наличие мутаций c.169 G>A и с.422 G>A во 2-м и 5-м экзонах гена PMM2 у пациентки с болезнью Жакена. Результаты секвенирования представлены на рисунках 1 и 2.

Рисунок 1 — Мутация c.169 G>A во втором экзоне гена PMM2 (отмечена стрелкой) у пациентки с установленным диагнозом CDG-Ia
Рисунок 2 — Мутация с.422 G>A в 5-м экзоне гена PMM2 (отмечена стрелкой) у пациентки с установленным диагнозом CDG-Ia

Мутация с.422 G>A (R141H) в 5-м экзоне гена PMM2 приводит к замене аминокислоты аргинина на гистидин в кодоне 141. Это самый частый мутантный аллель, который обнаружили у 75% пациентов с болезнью Жакена европейского происхождения. Мутация с.422 G>A не описана в гомозиготном состоянии. Вторая мутация c.169 G>A во 2-м экзоне гена PMM2 приводит к замене аминокислоты глицина на аргинин в кодоне 57. Это редкая мутация. В доступных нам источниках литературы повреждение в этом кодоне упоминается лишь дважды. В обоих случаях речь идет о замене c.169 G>С; это приводит к такому же изменению аминокислотной последовательности белка, что и c.169 G>A.

У 4-х пациентов с предположительным диагнозом CDG-Ia патогенные мутации не были выявлены. Обнаружено носительство доброкачественного полиморфизма g.18385 T>C (rs11074924, c.447+19T>C) у одного пациента в гомозиготном и у двоих - в гетерозиготном состоянии.

С учетом полученных результатов мы рекомендуем использовать прямое секвенирование гена PMM2 для диагностики болезни Жакена.

Вид патентной защиты: отсутствует.