Цель работы - разработать метрологически аттестованную методику выполнения измерений содержания гидроксикарбамида в воздухе рабочей зоны.

Научная новизна исследований: впервые в Республике Беларусь разработана методика выполнения измерений содержания гидроксикарбамида в воздухе рабочей зоны.

Методика основана на концентрировании гидроксикарбамида из воздуха на бумажные обеззоленные фильтры «синяя лента», десорбции его с фильтров деионизованной водой и количественном определении методом высокоэффективной жидкостной хроматографии при длине волны 200 нм.

Разработка методики проводилась на жидкостном хроматографе Agilent 1260 Infinity (Agilent Technologies, США) с диодно-матричным детектором. В соответствии с составом структурных групп анализируемого вещества была подобрана колонка хроматографическая стальная длиной 250 мм диаметром 4,0 мм, зернением 5 мкм Hypersil ОDS. В качестве растворителя была выбрана дистиллированная вода, поскольку гидроксикарбамид легкорастворим в воде.

Для отработки методики в качестве подвижной фазы были использованы смеси растворителей: деионизованная вода - ацетонитрил; деионизованная вода - метанол, ацетонитрил - буферный раствор с рН 2,84 в разных соотношениях, температура колонки -25 °С, время анализа - 10 мин. В качестве подвижной фазы была выбрана смесь ацетонитрил + вода, поскольку при использовании данной смеси в соотношении 10:90 соответственно хроматографический пик являлся наиболее симметричным - коэффициент асимметрии был наиболее близок к 1. Длина волны подбиралась в соответствии с изучением спектра поглощения гидроксикарбамида в УФ-области.

На основании проведенных исследований были подобраны следующие условия хроматографирования: колонка стальная длиной 250 мм, внутренним диаметром 4 мм, содержащая Hypersil ODS C18, зернением 5 мкм; подвижная фаза для ВЭЖХ: смесь ацетонитрил - вода (10:90); скорость потока подвижной фазы - 0,4 см³/мин; температура колонки - 25 °С; рабочая длина волны: 200 нм; объем вводимой пробы - 20 мкл. При данных условиях минимально детектируемое количество гидроксикарбамида составляло 2,5 нг.

При отборе проб воздух с объемной скоростью 10 дм³/мин протягивают в течение 25 мин с помощью аспирационного устройства через бумажный фильтр обеззоленный «синяя лента», помещенный в пластмассовый фильтродержатель. В одной точке отбирают не менее двух проб. При отборе проб одновременно измеряют температуру в месте отбора проб и атмосферное давление. Фильтры с отобранной пробой воздуха помещают в бюксы с притертой пробкой, пробы пригодны для анализа в течение 5 дней при хранении в защищенном от света месте при температуре не выше 25°С.

Фильтры помещают в стеклянный флакон с завинчивающейся крышкой, приливают 5 см³ деионизованной воды. Флаконы закрепляют на аппарате для встряхивания и взбалтывают в течение 30 мин. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой, экстракцию повторяют еще раз. Экстракты объединяют. Обработка контрольной пробы происходит при тех же условиях, что и исследуемых образцов. В качестве контрольной пробы используют чистый фильтр.

Растворы анализируют на жидкостном хроматографе при описанных выше условиях. По градуировочному графику находят содержание гидроксикарбамида в контрольной и измеряемой пробах. Концентрацию гидроксикарбамида в растворах анализируемой пробы рассчитывают после вычитания значения площади контрольной пробы. Концентрацию гидроксикарбамида в воздухе рабочей зоны определяют, учитывая его концентрацию в растворе анализируемой пробы, полученную по градуировочному графику, объем анализируемой пробы и объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям.

На основании проведенных исследований разработана МВИ.МН 5716-2016. «Методика выполнения измерений концентраций гидроксикарбамида в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии». Метрологические характеристики / методики приведены в таблице.

Таблица — Диапазон измерения гидроксикарбамида в воздухе рабочей зоны, значения показателей повторяемости, промежуточной прецизионности, максимальной расширенной неопределенности методики при доверительной вероятности р=0,95.