УДК: 616.155.392-036.11:575.1
Год издания: 2019

Прогностическое значение аберраций гена IKZF1 у пациентов с B-клеточным острым лимфобластным лейкозом

Вшивкова О.С.Мелешко А.Н.
Рубрики: 34.15.2334.15.5176.29.33
Республиканский научно-практический центр детской онкологии, гематологии и иммунологии
Сроки выполнения НИР: июнь 2016 г. — июнь 2019 г.
Научный руководитель: А.Н. Мелешко.
Источник финансирования: госбюджет.

Во всем мире протоколы лечения острого лимфобластного лейкоза (ОЛЛ) основаны на риск-адаптивной терапии, т. е. поиске факторов для стратификации по группам риска для наиболее оптимального лечения пациентов, что позволило достичь высоких результатов. Однако рецидив ОЛЛ по-прежнему является наиболее частой причиной плохого исхода, и, как правило, его сложно прогнозировать. Основной задачей является поиск генетических событий, связанных с развитием рецидива. Согласно многочисленным данным аберрации IKZF1 являются ранним событием лейкозогенеза и практически всегда наследуются в рецидивном клоне опухолевых клеток.

Цель исследования - оценить влияние аберраций гена IKZF1 на эффективность и исход терапии ОЛЛ в комплексе с другими цитогенетическими, генетическими и иммунофенотипическими признаками при использовании протоколов лечения Москва-Берлин (MB).

Исследуемая группа пациентов

В исследование включено 217 пациентов с первичным В-ОЛЛ, вышедших в полную ремиссию. Все пациенты были диагностированы в РНПЦ детской онкологии, гематологии и иммунологии с 2002 по 2017 гг. и проходили лечение с использованием протоколов MB.

Методы анализа аберраций гена IKZF1

Уровень экспрессии изоформ Ikaros определяли количественно в 9 отдельных полимеразных цепных реакциях (ПЦР) в «реальном времени», как описано ранее.

Для выявления делеций IKZF1 использовали два метода на основе ПЦР: анализ наиболее распространенных делеций экзонов 1-6 (ΔEx1-6) и 3-6 (ΔEx3-6) методом ПЦР и анализ четырех типов делеций (ΔEx1-6, 3-6, 1-7 и 3-7) методом мультиплексной флуоресцентной ПЦР с фрагментным анализом.

Статистический анализ

Время выживаемости без рецидива рассчитывалось от даты выхода в полную ремиссию до даты рецидива. Сравнение параметров по подгруппам проводилось с использованием критериев Пирсона, Манна-Уитни, точного критерия Фишера; лог-рангового критерия Мантеля-Хензеля. Значения р<0,05 считались статистически значимыми.

Статус гена IKZF1 считали «аберрантным» в случае обнаружения делеции с использованием ПЦР и/или сверхэкспрессии одной или более коротких изоформ. Группа со статусом гена «IKZF1 аберрантный» включала 21 пациента и 196 были включены в группу «IKZF1 нормальный» (таблица 1).

Таблица 1. - Сравнительный анализ клинических характеристик исследуемой группы пациентов в зависимости от статуса IKZF1


В группе пациентов с аберрациями IKZF1 инициальный лейкоцитоз >30x109/л регистрировался чаще по сравнению с группой без аберраций (p = 0,019); пациенты с аберрациями были старше (р = 0,004).

Аберрации IKZF1 чаще выявлялись у пациентов с транслокацией BCR/ABL1 (p = 0,041), при транслокации TEL/AML1 случаев аберраций IKZF1 не обнаружено (p = 0,016).

При анализе показателей раннего ответа выявлено, что наличие аберраций IKZF1 сопровождалось замедленным клиренсом бластных клеток: уровень МРБ на 15-й день химиотерапии был значительно выше, чем у лиц без аберраций (более 1 % клеток на 15-й день терапии у 62,5 и 31,8 % соответственно; р = 0,028). Аналогичные различия были получены на 36-й день терапии (более 0,01 % клеток на 36-й день терапии у 82,4 и 46,1% пациентов соответственно; р = 0,009).

Период наблюдения для оценки отдаленных результатов лечения составил 78,5 мес. Частота рецидивов была более чем в 2 раза выше в группе пациентов с аберрациями (52,4 против 21,4 %) (таблица 2).

Таблица 2. - Результаты лечения в исследуемой группе пациентов (n = 217), все группы риска

IKZF1 нормальный, n = 196
IKZF1 аберрантный, n = 21
р
n (%)
n (%)
Исход лечения
Частота рецидивов
42 (21,4)
11 (52,4)
CCR
150 (76,5)
9 (42,9)
Пятилетняя БРВ
78,3±0,03
50,0±0,11
0,001

Только 42,9 % пациентов с аберрациями находятся в полной цитологической ремиссии (CCR), тогда как в группе с нормальным статусом гена - 76,5 %.

Пятилетняя БРВ составила 50,0±0,11 % в группе с аберрациями против 78,3±0,03 % в группе с нормальным статусом гена IKZF1 (p = 0,001) (рисунок (A)). Указанные выше различия в показателях выживаемости были достигнуты за счет пациентов SRG (рисунок (B-D)).


Рисунок - Безрецидивная выживаемость (БРВ) в исследуемой когорте пациентов в зависимости от статуса IKZF1

A - БРВ исследуемой когорты (n = 217); B - БРВ пациентов стандартной группы риска (n = 140); C - БРВ пациентов группы промежуточного риска (n = 53); D - БРВ группы высокого риска (n = 24)

Мы провели сравнение основных клинических показателей и результатов лечения (таблица 3) только для пациентов SRG. У них SRG среди всех анализируемых параметров (включая начальное количество лейкоцитов, клиренс бластных клеток в костном мозге, а также МРБ) только аберрации гена IKZF1 были связаны с повышенным риском развития рецидива.

Таблица 3. - Результаты лечения пациентов стандартной группы риска (n = 140) в зависимости от статуса IKZF1

IKZF1 нормальный, n = 134
IKZF1 аберрантный, n = 6
р
n (%)
n (%)
Исход лечения
Частота рецидивов
19 (14,1)
4 (66,7)
CCR
115 (85,2)
2 (33,3)
Пятилетняя БРВ
78,3±0,03
33,0±0,19
<0,001

Пациенты SRG с аберрациями IKZF1 имели гораздо более низкие показатели 5-летней БРВ (33±0,19 против 78,3±0,03 % в группе с нормальным статусом гена; р<0,001) и более высокую частоту рецидивов (66,7 против 14,1 %; р<0,001). Только 33,3 % пациентов с аберрациями находятся в CCR, тогда как в группе с нормальным генным статусом - 85,2 %.

Выводы

1. Пациенты стандартной группы риска (SRG) с аберрациями IKZF1 имеют более низкие показатели 5-летней БРВ и более высокую частоту развития рецидива.

2. У пациентов промежуточного и высокого риска наличие аберраций способствует замедленному клиренсу бластных клеток на 15-й и 36-й дни терапии, однако не оказывает значимого влияния на показатели выживаемости.

3. У пациентов промежуточного и высокого риска нет необходимости проводить диагностику аберраций IKZF1, в то же время она остро необходима у пациентов SRG, поскольку других маркеров для оценки прогноза при первичной диагностике в этой группе практически нет.


Область применения: молекулярная диагностика острых лимфобластных лейкозов.
Рекомендации по использованию: разработанный метод (инструкция по применению метода определения внутригенных делеций в гене IKZF1 при В-ОЛЛ у детей и молодых взрослых (регистрационный № 068-0519)) внедрен и успешно применяется в РНПЦ детской онкологии, гематологии и иммунологии при первичной диагностике острых лейкозов.
Предложения по сотрудничеству: авторы уведомляют о возможности в случае наличия показаний анализа аберраций IKZF1 на базе РНПЦ детской онкологии, гематологии и иммунологии гражданам Республики Беларусь, а также иностранным гражданам в форме экспорта услуг.


в начало med.by баннеры учреждения авторы расширенный поиск
Достижения медицинской науки Беларуси.
Copyright © 1997-2022 НИО РНМБ
Вопросы и комментарии просьба отправлять Администратору сайта