Цель исследования - разработать и внедрить метод диагностики иммунологической реактивности реципиента почечного аллотрансплантата к антигенам донорского органа с целью оптимизации иммуносупрессивной терапии в посттрансплантационном периоде.

При трансплантации почки 74 реципиентам на этапе подготовки органа к пересадке из донорского материала выделяли парааортальные лимфатические узлы с последующим получением лимфоцитарного диагностикума. Затем у реципиентов почечного аллотрансплантата определяли аллоиммунный ответ на антигены донорского органа путем сравнения коэффициента прироста для субпопуляции CD3⁺HLA-DR⁺ реципиента при инкубации лимфоцитов реципиента с лимфоцитарным диагностикумом, полученным из лимфатических узлов донорского органа, фитогемагглютинином (ФГА) и при инкубации монокультуры лимфоцитов реципиента.

Полученная лимфоцитарная взвесь, приготовленная из регионарных лимфатических узлов донора, имела в своем составе CD3⁺лимфоциты (экспрессирующие молекулы HLA) I класса (51,30 % [40,8; 67,9]) и В-лимфоциты (экспрессирующие молекулы HLA II класса (47,30 % [29,4; 52,4]). Было проведено культивирование лимфоцитов реципиента в течение 72 ч. Первый образец (№ 1) - контрольный, предназначен для оценки реакции в приготовленной смеси. Во второй образец (№ 2) перед культивацией добавляли 0,1 мл лимфоцитарного диагностикума. В третий образец (№ 3) перед культивацией добавляли 0,1 мл ФГА. У всех пациентов при анализе культивации лимфоцитов в среде с добавлением ФГА был отмечен значимый рост субпопуляции CD3⁺HLA-DR⁺ (р = 0,000002) в сравнении с контролем. Для всех пациентов путем математического расчета был определен коэффициент прироста. Разброс коэффициентов прироста для CD3⁺HLA-DR⁺_лд находился в пределах от -5,56 % (нижний квартиль) до +90,48 % (верхний квартиль). Коэффициент прироста для CD3⁺HLA-DR⁺_фга составил +135,65 % (нижний квартиль) до +683,33 % (верхний квартиль).

Результат работы заключается в оценке аллогенного иммунного ответа реципиента по уровню изменения экспрессии HLA-DR, детектированному с помощью проточной цитофлуориметрии на лимфоцитах, после их инкубации в среде с донорским лимфоцитарным диагностикумом, несущим на себе антигены главного комплекса гистосовместимости I и II классов, полученным из лимфатических узлов донора. Положительный коэффициент прироста CD3⁺HLA-DR⁺ после инкубации лимфоцитов реципиента с лимфоцитарным диагностикумом подтверждает положительный аллогенный иммунный ответ.