Наиболее распространенными среди Ph-негативных (BCR-ABL1-негативных) хронических миелопролиферативных заболеваний (ХМПЗ) являются истинная полицитемия (ИП), эссенциальная тромбоцитемия (ЭТ) и идиопатический миелофиброз (ИМ).

Основная проблема в диагностике ХМПЗ до недавнего времени заключалась в отсутствии точного метода подтверждения клонального характера заболевания с целью дифференциации от реактивного эритро- и тромбоцитоза. В последние годы для диагностики ХМПЗ стали применяться молекулярно-генетические маркеры клональной миелопролиферации. Наиболее значимыми из них являются соматические мутации генов JAK2 (V617F), CALR (del и ins) и MPL (W515L и W515K). Диагностическая значимость этих маркеров для каждой из форм ХМПЗ различна. Интерес также представляет зависимость клинико-лабораторных показателей пациентов от мутационного статуса при каждой из форм ХМПЗ.

Цель исследования - дать оценку распространенности и клинической значимости соматических мутаций генов JAK2, CALR и MPL в группах пациентов с ИП, ЭТ и ИМ.

В исследование были включены 359 пациентов, проходивших обследование в ГУ «РНПЦ РМ и ЭЧ» в период 2014-2018 гг. Группы исследования составили 132 пациента с диагнозом «истинная полицитемия» с медианой возраста 62,5 года, 108 пациентов с диагнозом «эссенциальная тромбоцитемия» - 60,5 лет и 119 пациентов с диагнозом «идиопатический миелофиброз» - 62 года.

Материалом для исследования являлись образцы ДНК, выделенные из цельной венозной крови. Мутацию V617F гена JAK2 и мутации W515L и W515K гена MPL анализировали методом ARMS-PCR. Мутации del/ins (тип 1 и тип 2) гена CALR анализировали методом ПЦР с использованием двух праймеров, фланкирующих 9-й экзон. Детекция продуктов ПЦР осуществлялась электрофоретически в агарозном геле с окраской бромистым этидием.

В группе ИП был выявлен только один тип мутации - V617F JAK2 с частотой 94,7 %. Среди пациентов старше 50 лет встречаемость этой мутации была статистически значимо больше, чем среди лиц в возрасте 50 лет и менее; p = 0,032. Различия по частоте встречаемости мутации V617F между подгруппами мужчин и женщин не выявлены. Также не установлены какие-либо клинически значимые различия по лабораторным показателям в зависимости от мутационного статуса.

У пациентов из группы ЭТ мутация JAK2 V617F сопровождала 66,7 % случаев. Группа JAK-положительных пациентов с ЭТ характеризовалась большей медианой возраста (p = 0,050) и существенно не отличалась по другим изучаемым показателям от группы пациентов, не имевших данной мутации. Кроме мутации V617F в данной группе были выявлены мутации гена CALR с частотой 16,7 % - у 5 мужчин и 13 женщин. В зависимости от наличия мутаций CALR также не выявлено заметных различий по клинико-лабораторным показателям между пациентами, за исключением возраста. У лиц с мутациями CALR медиана возраста была на 11 лет меньше (p = 0,030).

В группе ИМ мутация JAK2 V617F присутствовала в 66,4 % случаев. Медиана возраста у пациентов с мутацией JAK2 составила 64 года; без указанной мутации - 60 лет; p = 0,011. Мутации гена CALR выявлены у 14 обследуемых (11,8 %). Средний возраст пациентов с мутациями CALR (медиана 53 года) был значимо меньше, чем у лиц без данных мутаций (63 года); p = 0,025. Мутация MPL W515L, которая выявлена только в этой группе, сопровождала 6 случаев ИМ (5,0 %). Не выявлено статистически значимых различий в частоте мутации JAK2, CALR и MPL у пациентов разного пола.

В группе пациентов с ИМ мутация JAK2 была сопряжена с большим количеством эритроцитов и гемоглобина - в 1,28 и 1,32 раза; p<0,001 и p<0,001 соответственно в сопоставлении с пациентами без данной мутации, у которых медиана содержания эритроцитов 3,4*10¹²/л и гемоглобина 96,2 г/л была снижены относительно нормы. Также были выявлены статистически значимые различия количества лейкоцитов (p = 0,001), тромбоцитов (p = 0,003) и ЛДГ (p = 0,035): у пациентов с мутацией содержание лейкоцитов и тромбоцитов было соответственно в 1,45 и 2,27 раза больше (медиана 11,2 и 501,0*10⁹/л), а ЛДГ - в 1,48 раза меньше (медиана 327,0 Ед/л), чем у JAK2-отрицательных лиц.

В данной группе уровень ЛДГ в плазме крови JAK2-положительных пациентов (медиана 327 Ед/л) был в 2,1 раза ниже, чем у лиц с мутациями CALR (медиана 687,5 Ед/л, p = 0,011) и в 1,96 раза ниже, чем у MPL-положительных пациентов (медиана 641,5 Ед/л, p = 0,015), но значимо не отличался от такового у обследуемых без мутаций (p = 0,967).

При ИМ мутация MPL в 100 % случаев была сопряжена со спленомегалией, что в 5 раз чаще, чем при отсутствии каких-либо мутаций (p = 0,001), в 2,82 раза чаще, чем при наличии мутации JAK2 (p = 0,003) и в 2 раза чаще, чем при наличии мутации CALR (p = 0,052).