По данным Международного общества переливания крови по состоянию на 2018 г. выявлено более 300 антигенов эритроцитов человека, объединенных в 36 систем групп крови (АВО, Rh, Kеll, Duffy, Kidd, Lewis, P, MNS, Lutheran и др.), 13 коллекций и 2 серии. Согласно требованиям ВОЗ для обеспечения иммунологической безопасности трансфузий необходимо определение фенотипа по системам АВО, Rh и Кеll не только у доноров, но также у реципиентов эритроцитных компонентов крови и беременных женщин с обязательным выявлением антиэритроцитарных антител. Законодательно действующая в настоящее время в Республике Беларусь концепция совместимости при подборе пар «донор-реципиент» только по 3 антигенам (А, В и D) не соответствует современным требованиям и повышает риск аллоиммунизации трансфузионно опасными антигенами эритроцитов более чем на 15 %.

Цель исследования - на основе изучения спектра аллоиммунных антител и антигенов эритроцитов, выявляемых у доноров, реципиентов эритроцитных компонентов крови, беременных, определить необходимый перечень антигенов тест-эритроцитов, используемых для выявления антиэритроцитарных антител, разработать и внедрить метод медицинской профилактики в трансфузиологии и акушерстве на основе иммуногематологического скрининга аллоиммунных антител. Разработать и внедрить отечественный иммуногематологический диагностикум (панель тест-эритроцитов) для определения антиэритроцитарных антител.

Методы исследования: иммуногематологический, гелевая технология, статистический.

Сравнительный анализ проспективных данных за 2017 г. частоты встречаемости трансфузионно значимых эритроцитарных антигенов систем ABО (A, B), Резус (Rh) (D, C, c, E, e, С^w, D^u) и Kell (K, k) у доноров, реципиентов эритроцитных компонентов крови и беременных г. Минска и г. Гродно и Гродненской области показал, что у обследованных наблюдается соответствие по встречаемости антигенов эритроцитов по данным системам, за исключением того, что трансфузионно опасный антиген K системы Кеll в гомозиготном состоянии в обследованных группах г. Гродно и Гродненской области не встречался, а у пациентов и беременных г. Минска не был выявлен слабый антиген D^u.

На основании анализа проспективных за 2017 г. и ретроспективных данных за 2014-2016 гг. по выявлению аллоиммунных антиэритроцитарных антител у 49 372 доноров, 1017 пациентов и 235 беременных г. Минска и у 11 490 доноров, 525 пациентов и 17 954 беременных г. Гродно и Гродненской области установлено, что для населения Республики Беларусь шкала приоритета трансфузионно значимых антигенов эритроцитов представляет следующую очередность их распределения по частоте встречаемости: D>E>K>M>C^w>c>Fy^a>C>Jk^a, Le^a, Le^b, S, e, P1, Lu^a, Fy^b.

При учете данных по выявлению антиэритроцитарных антител у доноров г. Минска за период 2014-2017 гг. рассчитан индекс аллоиммунизации населения Республики Беларусь, который составил 0,4 %.

Разработан «Алгоритм составления панели тест-эритроцитов для установления специфичности антиэритроцитарных антител в гелевом методе» с учетом шкалы трансфузионно опасных антигенов для Республики Беларусь и специфичности выявляемых антител.

Создана база типированных доноров О(I) группы г. Минска, имеющих фенотип эритроцитов, соответствующий панели тест-эритроцитов (в рамках единой базы доноров АИС «ДОНОР» с имеющейся системой защиты информации II класса).

Разработан pегламент производства «Панель тест-эритроцитов для определения специфичности антиэритроцитарных антител» (РП ЛИСКК 01-2018) (утвержден директором РНПЦ трансфузиологии и медицинских биотехнологий от 12.06.2018).

Разработан и утвержден в установленном порядке пакет нормативно технической документации на производство изделия медицинского назначения (ИМН) «Панель тест-эритроцитов для определения специфичности антиэритроцитарных антител» (далее - панель тест-эритроцитов), который включает:

1. Технические условия ТУ ВY 190572781.044-2018 «Панель тест-эритроцитов для определения специфичности антиэритроцитарных антител» (государственная регистрация № 054925 от 17.01.2019; срок действия с 21.01.2019 до 21.01.2024).

2. «Инструкцию по применению панели тест-эритроцитов для определения специфичности антиэритроцитарных антител» (утверждена Министерством здравоохранения Республики Беларусь от 27.12.2018).

3. Макет этикетки на флакон с компонентами панели тест-эритроцитов для определения специфичности антиэритроцитарных антител.

4. Макет коробки на панель тест-эритроцитов для определения специфичности антиэритроцитарных антител.

На основе разработанной и утвержденной Министерством здравоохранения Республики Беларусь от 19.09.2018 «Программы и методики клинических испытаний изделия медицинского назначения: панель тест-эритроцитов для определения специфичности антиэритроцитарных антител» выполнены клинические испытания на трех утвержденных базах ГУ «Брестская областная станция переливания крови», УЗ «Гродненская областная станция переливания крови», УЗ «Могилевская областная станция переливания крови».

Согласно отчетам о проведении клинических испытаний на всех трех базах исследования «Панели тест-эритроцитов для определения специфичности антиэритроцитарных антител» серии 39 (5 наборов, в каждом 11 флаконов по 5 мл; дата изготовления 29.10.2018; срок годности до 29.12.2018) (Акт выпуска серии № 39 от 29.10.2018) производства ГУ «Республиканский научно-производственный центр трансфузиологии и медицинских биотехнологий» получены рекомендации к государственной регистрации, серийному выпуску и использованию в клинической лабораторной практике панели тест-эритроцитов для установления специфичности изо(алло)иммунных антиэритроцитарных антител в сыворотке крови доноров, беременных и других обследуемых лиц с помощью реакции агглютинации в геле.

Получено регистрационное удостоверение Министерства здравоохранения Республики Беларусь № ИМ-7.107191 от 20.12.2018 на ИМН «Панель тест-эритроцитов для определения специфичности антиэритроцитарных антител» (изготовитель: Государственное учреждение «Республиканский научно-практический центр трансфузиологии и медицинских биотехнологий», действительно до 20.12.2023).

За период выполнения задания с 28.05.2018по 04.06.2019 был организован выпуск 6 серий панели тест-эритроцитов в количестве 38 наборов.

Разработана инструкция по применению «Метод медицинской профилактики посттрансфузионных осложнений гемолитического типа и аллосенсибилизации при беременности» (регистрационный № 254-1218, утверждена Министерством здравоохранения Республики Беларусь 25.04.2019) (далее - инструкция).

Проведена апробация данной инструкции с 18.02.2019 по 21.03.2019 в УЗ «Гродненский областной клинический перинатальный центр» с использованием панели тест-эритроцитов серии № 5 (дата изготовления 07.02.2019;срок годности - до 07.04.2019) по итогам которой из 35 обследованных беременных антиэритроцитарные антитела выявлены у 14 (40 %) со специфичностью: а-D - у 11, а-D+С - у 1, а-Е - у 1, а-К - у 1 (Отчет о клиническом испытании от 21.03.2019).

На базе УЗ «Гродненская областная станция переливания крови» с 30.04.2019 по 31.05.2019 осуществлено практическое использование данной инструкции по выявлению антиэритроцитарных антител у 42 изоиммунных доноров (выявлены у 39 со специфичностью: а-D - 32, а-D +С - 4, а-D +С +S - 1, а-D +С +М+S - 1, а-D +С + Fya - 1); 30 пациентов (выявлены у 7: а-D - 3, а-D + K - 1, а-Leb - 1, а-M - 1, а-s - 1); 1148 беременных (выявлены у 29: а-D - 24 (титры 1:256 - 1, 1:32 - 3, 1:16 - 2, 1:4 - 13, 1:12 - 6), а-DC - 1 (титр 1:32), а-с - 1 (титр 1:2), а-М - 2 (титр 1:2), а-Leb - 1 (титр 1:2)) с использованием панели тест-эритроцитов серии № 11 (дата изготовления 01.04.2019, срок годности - до 01.06.2019) (Отчет о практическом применении от 03.06.2019).

Таким образом, предложенный метод медицинской профилактики на основе иммуногематологического определения антиэритроцитарных антител позволяет выявлять аллосенсибилизацию у беременных с целью профилактики гемолитической болезни плода и новорожденного, а также снижает риски неблагоприятных исходов иммунных конфликтов при оказании трансфузиологической помощи (подбор пар «донор-реципиент»).