Обеспечение и гигиенический контроль безопасности биотехнологических производств представляет собой самостоятельную медико-биологическую проблему и требует разработки и метрологической оценки количественных методов определения концентраций микроорганизмов-продуцентов в воздухе рабочей зоны в соответствии с требованиями международной организации по стандартизации.

Цель исследования - разработать метрологически аттестованную методику концентрация клеток штамма дрожжевых грибов Saccharomyces cerevisiae Л153 в воздухе рабочей зоны.

Хлебопекарные дрожжи семейства Saccharomycetaceae относятся к приоритетным промышленным штаммам микроорганизмов и широко используются как биотехнологические продуценты. В результате комплексных токсиколого-гигиенических исследований, включающих оценку иммуноаллергологических, гематологических, дисбиотических и диссеминирующих показателей, установлена предельно допустимая концентрация дрожжевых клеток штамма Saccharomyces cerevisiae Л153 в воздухе рабочей зоны (ПДКврз). Гигиенический норматив «Предельно допустимая концентрация микробных клеток Saccharomyces cerevisiae штамма Л153 в воздухе рабочей зоны» составляет 1000 клеток/м³.

На основании результатов экспериментального моделирования аэрозолей микроорганизмов-продуцентов в воздухе рабочей зоны как фактора риска воздействия на здоровье работников биотехнологических производств разработана методика выполнения измерений концентрации клеток штамма дрожжевых грибов Saccharomyces cerevisiae Л153 и рассчитаны ее метрологические параметры.

Методика измерений разработана в соответствии с ГОСТ 8.010 и основана на аспирации из воздуха рабочей зоны клеток штамма Saccharomyces cerevisiae Л153 на поверхность культуральной среды и подсчете колоний, имеющих типичные морфологические и биохимические признаки, сформированны при 30±1 °С в течение 48±2 ч инкубирования.

Основными этапами разработанной методики являются: подготовка аспиратора; приготовление питательной среды оптимизированного состава, контактных чашек с питательными средами; отбор проб воздуха; культивирование отобранных проб; идентификация микроорганизмов по культурально-морфологическим, тинкториальным и биохимическим признаком; обработка результатов измерений; расчет концентрации клеток продуцента (КОЕ/м³) по предложенной формуле; проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях повторяемости; оценка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях промежуточной прецизионности; оформление результатов измерений.

В ходе метрологической аттестации оценивали следующие характеристики: показатели прецизионности ( r, I(O), r, rI(O); неопределенность U. Расчет неопределенности измерений произведен в соответствии с ISO/TS 19036 «Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Руководство по оценке неопределенности измерения для количественных определений. Изменение 1: Неопределенность измерений при низких значениях», что предполагает более простой и релевантный алгоритм расчета. Кроме того, в МВИ установлены показатели прецизионности, объединенные для всего диапазона измерений как максимальные значения для трех уровней измерений: 15-50, 51-200 и 201-2000 КОЕ/м³ (таблица).

Таблица - Значения показателей прецизионности (повторяемости, промежуточной прецизионности, пределов повторяемости и промежуточной прецизионности) и максимальной расширенной неопределенности при уровне доверия р = 0,95 для методики выполнения измерений