УДК: 616:579.61
Год издания: 1998
ТЕСТ-СИСТЕМА ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ “ЭНТЕРО-стрип” ДЛЯ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ПАТОГЕННЫХ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ
Титов Л.П., Ермакова Т.С., Паньшина Е.Ф., Горбунов В.А.
Рубрики: 76.03.43, 76.35.33
Тема НИР: “Разработать тест-систему для дифференциации патогенных энтеробактерий”.
Сроки выполнения НИР: III кв. 1996 г. - IV кв. 1997 г.
Научный руководитель: д-р мед. наук, проф. Л.П. Титов.
Нами предложена быстрая, простая и экономичная дифференциально-диагностическая тест-система “ЭНТЕРО-стрип” для определения биохимических свойств и последующей идентификации энтеробактерий.
Тест-система представляет собой экспрессивные качественные микропробы дегидратированных специфических субстратов, иммобилизованных на поверхности лунок полистироловых стрипов, укомплектованных в планшеты. Это стандартные методы видовой идентификации кишечных бактерий, осуществляемой на основе изучения их энзиматической активности. При этом метаболиты бактерий выявляются либо благодаря изменению цвета индикатора, либо по цветной реакции при добавлении соответствующего реактива.
Для создания тест-системы нами были выбраны 24 теста, наиболее актуальные для дифференциации. Эти тесты были разделены на 3 группы: ЭНТЕРО-стрип-1 - 8 ключевых биохимических проб для идентификации большинства энтеробактерий; ЭНТЕРО-стрип-2 - 8 вспомогательных биохимических проб; ЭНТЕРО-стрип-3 - 8 дополнительных биохимических проб. Созданная тест-система снабжена таблицами для идентификации микроорганизмов по результатам биохимических реакций.
Оценку дифференцирующей значимости выбранных тестов, частоту совпадений результатов исследований провели на 125 изолятах энтеробактерий (6 - стандартные тест-штаммы, 119 - выделены от больных) параллельно на разработанной нами тест-системе и классическим (пробирочным) методом по 24 тестам. Максимальное совпадение результатов было получено в тестах на гидролиз мочевины, желатины, наличие лизиндекарбоксилазы, аргининдигидролазы, фенилаланиндезаминазы, кислотообразование на манните, инозите, адоните, ксилозе, арабинозе, сахарозе, сорбите, галактозе, лактозе, глицерине, глюкозе. Частота совпадений результатов идентификации составила 97-100%.
Лабораторную апробацию тест-системы “ЭНТЕРО-стрип” проводили в сравнении с зарубежными аналогами: “Enterotest I, 2” (Lachema, Чехия) и API 20E (bioMerieux, Франция) на 129 изолятах энтеробактерий, полученных из клинического материала. Разработанная нами тест-система показала полное совпадение результатов идентификации с коммерческими аналогами.
Область применения: клиническая и лабораторная диагностика.
Рекомендации по использованию: разработанная тест-система может быть внедрена в биомедицинских лабораториях НИИ, больниц, баклабораториях центров гигиены и эпидемиологии.
Предложения по сотрудничеству: консультативная помощь при внедрении, совместные разработки с РЦГЭ.