В последние годы наиболее перспективным способом выделения клеток является магнитная сепарация. Создание нового способа выделения клеток актуально как для совершенствования методов идентификации и сепарации субпопуляций лимфоцитов в экспериментальных условиях, так и при разработке новых иммунодиагностических панелей для иммунофенотипирования различных форм гемобластозов, подборе доноров при типировании по системе HLA.

Целью нашего исследования являлась разработка методики выделения популяции В-лимфоцитов из периферической крови доноров с помощью метода иммуномагнитной сепарации.

В течение 1997-1998 гг. в наших исследованиях использовалась кровь 60 доноров Витебской областной станции переливания крови. Проведено три серии опытов по выделению лимфоцитов из цельной крови, лейкоконцентрата, взвеси мононуклеаров. В разработанной нами методике в основу выделения В-лимфоцитов положен метод разделения клеток по поверхностным мембранным дифференцировочным антигенам (CD) с помощью полистироловых (с включением магнетита) микросфер. Микросферы, разработанные на основе конъюгации моноклональных антител (ИКО-91 к CD22 антигену) на поверхности магниточувствительных микроносителей (иммс), вносили к мононуклеарам крови из расчета 1 : 10. В серии опытов было установлено, что оптимальным условием связывания иммс с клетками-мишенями (В-лимфоциты) является инкубация смеси при 4°С в течение 40 мин. Образующиеся комплексы (иммс + В-лимфоцит) выделяли с помощью лабораторного сепаратора БЕЛСЕП-1. После фиксации и окраски розетированных комплексов проводили учет реакции; положительно связанными считали клетки, присоединившие не менее трех микросфер. В результате проведенных исследований было выявлено, что выделение В-лимфоцитов, несущих CD22 поверхностные антигены, составило 19% от всей популяции лимфоцитов крови, что статистически достоверно отличается от контроля и соответствует данным зарубежных авторов.