УДК: 612.014:537.811
Год издания: 1998
РАЗРАБОТКА СПОСОБА ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОМАГНИТНЫХ МИКРОСФЕР
Панфилов А.С., Гутман М.Б., Хулуп Г.Я.
Рубрики: 76.03.55, 76.29.33
Тема НИР: “Разработать способ профилактики реакции трансплантат-против-хозяина (РТПХ) при аллотрансплантации костного мозга и способ выделения В-лимфоцитов для типирования доноров. Этап 01.03. Изготовить и провести испытания иммуномагнитных микросфер на основе прир
Сроки выполнения НИР: I кв. 1997 г. - II кв. 1998 г.
Научный руководитель: член-кор. НАНБ, проф. О.-Я.Л. Бекиш, канд. мед. наук Г.Я. Хулуп.
Целью нашего исследования был подбор качественного и количественного состава вспомогательных веществ для получения однородных полистироловых микросфер с равномерным включением магнетита и определение оптимального способа активации, обеспечивающего высокую связывающую активность микросфер при сепарации клеток. Таким образом решалась задача по созданию продукции, не уступающей импортным аналогам по эффективности выделения клеток и при этом значительно более дешевой.
В ходе проведенных исследований определено влияние различных физико-химических факторов на процесс микрокапсулирования методом эмульсионной полимеризации (температура, вязкость среды). В качестве дисперсионной среды использовался глицерин, в качестве катализатора (инициатора) процесса - азо-бис-изобутиронитрил. В ходе исследований подобран оригинальный и эффективный состав вспомогательных веществ, обеспечивающий синтез микросфер, отвечающих основным параметрам качества. Проведено изучение сравнительной эффективности активации полученных микросфер различными методами для конъюгации с моноклональными антителами и иммуноглобулинами IgM, IgG.
Установлено, что наилучшие результаты дает химический метод активации - с помощью паратолуол-сульфонилхлорида (т.н. тосилактивация). Изучение размеров микросфер и удельной площади их поверхности на лазерном анализаторе зернистости фирмы Fritsch (Германия) показало, что полученная суспензия состоит из однородных частиц круглой, правильной формы со средним размером 3,56-4,22 мкм и с равномерным включением магнетита в количестве 25%.
Использование синтезированных нами магнитных микрочастиц для позитивной и негативной сепарации клеток показало высокую эффективность выделения субпопуляций клеток крови и костного мозга. Все это открывает широкие перспективы для использования полученных нами иммуномагнитных микросфер из полистирола в медико-биологических исследованиях, диагностике и лечении заболеваний крови.
Область применения: гематология, иммунология, генная инженерия.
Рекомендации по использованию: метод может применяться в диагностических и лечебных целях.
Предложения по сотрудничеству: консультативная помощь при внедрении.