|
УДК: 618.34-022.7
Год издания: 1999
ВЫДЕЛЕНИЕ ИЕРСИНИЙ ИЗ ОБЪЕКТОВ ВНЕШНЕЙ СРЕДЫ И ИХ ИДЕНТИФИКАЦИЯ
Титов Л.П., Ермакова Т.С., Паньшина Е.Ф., Астапов В.А.
Рубрики: 76.03.43, 76.35.33
Тема НИР: “Выделение иерсиний из объектов внешней среды и их идентификация”.
Сроки выполнения НИР: 1996 г. - 1998 гг.
Научный руководитель: д-р мед. наук, проф. Л.П. Титов.
Предложена оригинальная схема выделения иерсиний из объектов внешней среды, включающая бактометрические исследования; время, необходимое для выделения и идентификации иерсиний, было сокращено до 3-5 суток. Предлагаемые этапы выделения: “холодовое обогащение”, щелочная обработка поташом, накопление в селективной среде Yersinia Selective Enrichment Broth (Merck, Германия), посев на плотные элективные среды (CIN-агар и агар-Wauters; Merck, Германия). Накопление в селективной среде можно проводить в лунках бактометра с одновременным контролем чистоты изолята. При 15°С выделено 32 изолята, соответствующих по биохимическим свойствам иерсиниям; создана коллекция изолятов иерсиний.
Предложена оригинальная таблица для определения видовой принадлежности иерсиний с учетом небольшого числа признаков. К роду Yersinia предположительно можно отнести изоляты, не выделяющие сероводород, не утилизирующие цитрат, не имеющие фенилаланиндезаминазы, желатиназы и аргининдигидролазы, утилизирующие глюкозу и маннит; большинство из них уреазоположительные. Далее по реакциям на сахарозу, выделение индола, орнитиндекарбоксилазу, галактозу, рамнозу и мелибиозу можно определить видовую принадлежность изолята.
Проведен подбор компонентов оригинальной селективной среды для выделения иерсиний при помощи разработанной нами методики бактометрической оценки пригодности питательных сред. Проведена статистическая обработка результатов; некоторые варианты среды показали достаточное ингибирующее действие на культуры микроорганизмов, часто сопровождающих иерсинии (E. coli, Proteus mirabilis) при сравнительно успешном росте Y. enterocolitica.
Подготовлен проект методических рекомендаций о методах выделения иерсиний из объектов окружающей среды и их идентификации для работников санэпидслужбы.
Область применения: клиническая лабораторная диагностика.
Рекомендации по использованию: метод может быть внедрен в бактериологических лабораториях и СЭС.
Предложения по сотрудничеству: апробация подготовленных методических рекомендаций в лабораториях санэпидслужбы.