|
УДК: 612. 014. 537
Год издания: 1999
ИССЛЕДОВАНИЕ СВЯЗЫВАЮЩЕЙ СПОСОБНОСТИ МИКРОСФЕР С АНТИТЕЛАМИ
Ананьева В.С., Карусевич А.А.
Рубрики: 76.03.55, 76.29.33
Тема НИР: “Завершить разработку способа профилактики реакции трансплантат-против-хозяина (РТПХ) при аллотрансплантации костного мозга и способа выделения В-лимфоцитов для типирования доноров”.
Сроки выполнения НИР: IV кв.1998 г. - IV кв. 1999 г.
Научный руководитель: чл.-кор. НАНБ, проф. О.-Я.Л. Бекиш, д-р мед. наук Г.Я. Хулуп.
Соисполнители: ЦНИЛ Витебского государственного медицинского университета.
Иммуномагнитные микросферы (ИММС) используются как для негативной сепарации, так и для обогащения выделяемой фракции клеток - позитивной сепарации.
Магниточувствительные полимерные микросферы, являясь твердофазными носителями моноклональных антител (МКАТ), применяются для связывания поверхностных антигенов мембран для сепарации клеток и ферментов, микроорганизмов, вирусов.
Цель исследования - определение оптимального способа активации, обеспечивающего высокую связывающую способность микросфер c МКАТ при сепарации клеток.
При проведении исследований в качестве твердофазных носителей использовались магниточувствительные полистироловые микросферы. Конъюгацию магниточувствительных микросфер (ММС) с МКАТ проводили по собственной методике.
Изучена эффективность различных методов активации поверхности ММС с целью повышения их сорбционной емкости по отношению к антителам. Проведены исследования сорбционной емкости суспензии ММС стандартной концентрации, активированных глютаровым альдегидом и паратолуолсульфонилхлоридом.
Таким образом, в результате проведенных исследований было установлено, что ММС, активированные паратолуолсульфонилхлоридом, имеют самую высокую сорбционную емкость по отношению к антителам. Определена связывающая способность ММС с МКАТ - 99,0 ± 0,1%.
Разработана оптимальная технологическая схема активации поверхности микросфер для проведения их конъюгации с МКАТ, позволяющая осуществить максимальное насыщение микросфер иммуноактивными компонентами.
Использование ИММС для позитивной и негативной сепарации клеток показало высокую эффективность выделения субпопуляций клеток крови и костного мозга, что открывает широкие перспективы для их применения в медико-биологических исследованиях, диагностике.
Экономическая значимость полученных результатов определяется существенным снижением стоимости разработанных иммуномагнитных микроносителей по сравнению с ИММС, выпускаемыми зарубежными фирмами Dynal (Норвегия) и Myltenei (США).
Область применения: онкогематология.
Рекомендации по использованию: данный способ может быть внедрен в ЛПУ РБ.
Предложения по сотрудничеству: консультативная помощь при внедрении.