УДК: 616.441: 57.083.3:614.876
Год издания: 1999

РАЗРАБОТКА ИММУНОФЕРМЕНТНОЙ ТЕСТ-СИСТЕМЫ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К МИКРОСОМАЛЬНОЙ ФРАКЦИИ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Панько С.С.Лекторов В.Н.Панько С.В.Петренко С.В.Воропаев Е.В.Жаворонок С.В.Синкевич В.И.
Рубрики: 76.03.55

Тема НИР: “Разработать промышленные технологии и освоить производство отечественных наборов реактивов для иммуноферментного определения антител к органоспецифическим антигенам щитовидной железы в сыворотке и плазме крови человека”.
Сроки выполнения НИР: январь 1998 г. - декабрь 1998 г.
Научный руководитель: д-р мед. наук, проф. С.В. Жаворонок.

Целью исследования явилась разработка промышленной технологии тест-системы для иммуноферментного выявления аутоантител к микросомальной фракции щитовидной железы и ее апробация с использованием стандартной панели позитивных и негативных сывороток, а также аналоговой российской тест-системы фирм “Мультитест” и Dynotest Diagnostica GMBH.

Для получения чистых антигенов были разработаны мультистадийные методики, включающие этапы гомогенизации тканей, осаждения, центрифугирования и диализа. Наборы предназначены для качественного определения IgG-антител к микросомальному антигену и рассчитаны на 96 определений либо 42 анализа в дублях.

В основе действия тест-систем лежит иммуноферментный “сэндвич”-метод. Полистироловые плашки покрыты микросомальным антигеном высокой степени очистки. Образцы сывороток инкубируются в лунках. Присутствующие в образце антитела связываются с антигеном на твердой фазе. После отмывки добавляют антитела к IgG человека, конъюгированные с пероксидазой хрена. После второй инкубации несвязанный конъюгат отмывают, добавляют субстрат, и при наличии в лунках образцов специфических антител развивается желтое окрашивание. Цветная реакция останавливается серной кислотой. Оптическая плотность контролей и образцов измеряется на анализаторе при длине волны 490 нм и фоновой 620 нм.

Диагностическая чувствительность (Ч) и специфичность (С) тест-системы рассчитывались по формулам:
Ч (%) = КСП/КИП x 100 ,
С (%) = КСП/КИП x 100,
где КИП - количество исследованных проб, КСП - количество совпадающих по результатам проб (при расчете чувствительности брали позитивы, специфичности - негативы).

Было установлено, что Ч и С разработанной тест-системы и системы фирмы “Мультитест” идентичны и составляют 88 и 100% соответственно.

Установлено, что данные системы имеют диагностическую ценность не ниже систем сравнения и обладают всеми необходимыми качествами для широкого внедрения их в практику ЛПУ РБ.


Область применения: эндокринология, иммунология.
Рекомендации по использованию: метод внедрен в научный процесс ВФ НИКИ РМ и Э. Целесообразно проведение скрининга пациентов с иммунными и эндокринными расстройствами.
Предложения по сотрудничеству: консультативная помощь при внедрении; изготовление по заказам единичных изделий и малых партий продукции; реализация по конкурентным ценам готовой продукции; поставка и обучение пользованию; совместное изучение аутоиммунных расстройств различной этиологии


в начало med.by баннеры учреждения авторы расширенный поиск
Достижения медицинской науки Беларуси.
Copyright © 1997-2022 НИО РНМБ
Вопросы и комментарии просьба отправлять Администратору сайта