Целью исследования явилась разработка промышленной технологии тест-системы для иммуноферментного выявления аутоантител к микросомальной фракции щитовидной железы и ее апробация с использованием стандартной панели позитивных и негативных сывороток, а также аналоговой российской тест-системы фирм “Мультитест” и Dynotest Diagnostica GMBH.

Для получения чистых антигенов были разработаны мультистадийные методики, включающие этапы гомогенизации тканей, осаждения, центрифугирования и диализа. Наборы предназначены для качественного определения IgG-антител к микросомальному антигену и рассчитаны на 96 определений либо 42 анализа в дублях.

В основе действия тест-систем лежит иммуноферментный “сэндвич”-метод. Полистироловые плашки покрыты микросомальным антигеном высокой степени очистки. Образцы сывороток инкубируются в лунках. Присутствующие в образце антитела связываются с антигеном на твердой фазе. После отмывки добавляют антитела к IgG человека, конъюгированные с пероксидазой хрена. После второй инкубации несвязанный конъюгат отмывают, добавляют субстрат, и при наличии в лунках образцов специфических антител развивается желтое окрашивание. Цветная реакция останавливается серной кислотой. Оптическая плотность контролей и образцов измеряется на анализаторе при длине волны 490 нм и фоновой 620 нм.

Диагностическая чувствительность (Ч) и специфичность (С) тест-системы рассчитывались по формулам:
Ч (%) = КСП/КИП x 100 ,
С (%) = КСП/КИП x 100,
где КИП - количество исследованных проб, КСП - количество совпадающих по результатам проб (при расчете чувствительности брали позитивы, специфичности - негативы).

Было установлено, что Ч и С разработанной тест-системы и системы фирмы “Мультитест” идентичны и составляют 88 и 100% соответственно.

Установлено, что данные системы имеют диагностическую ценность не ниже систем сравнения и обладают всеми необходимыми качествами для широкого внедрения их в практику ЛПУ РБ.